冰冻切片固定实验
实验材料 冰冻组织
试剂、试剂盒 PFAPBS乙醇
仪器、耗材 加湿盒
实验步骤
1. 将承有切片的载玻片放入加湿盒中,加4%PFA覆盖整个切片,盖上加湿盒,如为预先未固定过的组织,则于室温放置20 min,如是固定过的组织则放置5 min。
2. 吸去固定液,用毛细吸管或用喷水瓶以3×PBS冲冼切片,并温育5 min。
3. 用1×PBS重复步骤2操作,吸去PBS,按顺序以30%、60%、80%、95%和100%乙醇依次冲洗切片,每次2 min。
4. 晾干载玻片并保存在放有干燥剂的密封盒中,于-70℃存放可达数周。开盒前应将其平衡至室温。
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