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冷凝集素试验

2021.6.09

1﹒检验方法学
(1)原理:
冷凝集素试验(col d agglutinin test):冷凝集素为可逆性抗体,在低温时与自身红细胞、“O ”型红细胞发生凝集,当温度增高时,凝集又消失。

(2)器材和试剂:
冰箱、水浴箱、试管、试管架、吸管(1ml和0.2ml)、玻璃棒;0型或与受检者ABO同型抗凝血、受检者血清、生理盐水。

(3)操作
1)分离标本血血清:
取被检者静脉血3ml,立即移入37℃试管内待血凝固后、用玻璃棒去除血块,置37℃水浴箱待血清析出,即离心分离血清,移入另一试管。

2)稀释系列血清:
取试管12支列于试管架上,各管加0.2ml生理盐水。第1管内加被检者血清0.2ml,用另1支吸管3次吹吸第1管混合血清,再取0.2ml移入第2支试管内,以此类推,至第11管后,吸弃0.2ml血清稀释液(系列血清稀释度为液1 ∶2~1 ∶2.048)。第12管为对照管,不加血清。

3)制备2%红细胞悬液:
取正常“0 ”型抗凝血1~2ml,用生理盐水洗涤红细胞3次后制备2%红细胞悬液。

4)置冰箱孵育:
在以上12支试管中各加红细胞悬液0.2ml,置4℃冰箱,≮2h,立即肉眼判读结果:

(++++):红细胞凝集成一大块,几乎无游离红细胞。

(+++):虽凝集成一大块,或2~3个大块,但约有1/4游离红细胞。

(++):有几个大凝集块,但约有1/2游离红细胞。

(+):只有小凝集颗粒,大部分为游离红细胞。

(±):与第12管对照有凝集,但未及“+”者。

5)置水浴箱:
将操作4)试管再置37℃水浴箱30min后,判读结果:若凝集块全部散开,示存在冷凝集素。

2﹒质量保证
①被检者血液在未分离血清前,不可置冰箱,否则,应置37℃水浴1h后,再分离血清。②若无O型红细胞,可用被检者自身红细胞或与被检者同型红细胞替代。③若冷凝集素滴度过高,可将血清作4倍系列稀释。

3﹒参考值
滴度<1 ∶16。

4﹒临床意义
各地区正常人血清冷凝集素参考值不一,故应确立本地区的参考值。冷凝集素滴度显著增高见于某些自身免疫性溶血性贫血(尤其冷凝集素病);也见于病毒性肺炎、传染性单核细胞增多症、热带嗜酸性粒细胞增多症、疟疾、多发性骨髓瘤、肝硬化等。

英文同义词: 
cold agglutination test 
参考文献: 
1 丛玉隆,王金良,李晓军,涂植光,熊立凡.实用检验医学 下册.第1版.北京.人民卫生出版社,2009年05月


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