离子交换色谱的流动相简介及其选择
离子交换色谱的流动相必须是有一定离子强度的并且对pH有一定缓冲能力的溶液。选择流动相时需要考虑以下几方面。
1、离子交换后，流动相pH的改变
基于离子交换的原理，目的分子在与介质上的反离子交换后，释放到溶液中的反离子可以使液相中的离子强度增大，pH可能会发生改变，有可能导致目的分子失活。所以，使用缓冲液可稳定流动相的pH，同时还可稳定目的分子上的电荷量，保证分离结果的重现性。
2、选择一合适的吸附pH
要使目的分子带有电荷并以适当的强度结合到离子交换介质上，需要选择一个合适的吸附pH。对于阴离子交换介质来说，吸附pH至少应高于目的分子等电点1个pH单位；而对于阳离子交换介质，则应至少低于目的分子等电点1个pH单位，这样可保证目的分子与介质间吸附的完全性。
3、吸附pH选好后，还需选择流动相的离子强度
吸附阶段应选择允许目的分子与介质结合达到的最高离子强度，而洗脱时要选择可使目的分子与介质解吸的最低离子强度。这也就定出了洗脱液离子强度的梯度起止范围。在介质再生之前，往往还需用第三种离子强度更高的缓冲液流洗柱床，以彻底清除可能残留的牢固吸附杂质。在大部分情况下，吸附阶段溶液盐浓度至少应在10mmol/mL以上，以提供足够的缓冲容量，但浓度不可过高，否则将影响载量。
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