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水杨酸钠的半衰期测定实验_比色法

2019.4.10

通过比色法测定水杨酸的半衰期,水杨酸根与铁离子起反应,形成一种紫色络合物,根据紫色络合物的颜色进行比色得光密度,将光密度代入公式计算得半衰期。本实验目的是掌握药物血浆半衰期(t1/2)的测定方法及计算血浆半衰期(t1/2

实验方法原理

水杨酸根与铁离子起反应,形成一种紫色络合物,根据紫色络合物的颜色进行比色得光密度,将光密度代入公式计算得半衰期。

实验材料

家兔

试剂、试剂盒

水杨酸钠溶液三氯醋酸溶液三氯化铁溶液肝素溶液

仪器、耗材

试管离心管刻度吸管注射器721 型分光光度计离心机吸管架酒精棉球干棉花竹签

实验步骤

1.  取兔一只,称体重,用经0.5%肝素湿润过的注射器从兔心取血2 ml(作对照血样),然后从耳静脉注入10%水杨酸纳溶液1.5 m/kg(150 mg/kg)。


2.  注射药后5分钟和35 分钟再从心脏取血2ml,将上述三次抽的血分别放入三支预先装有7ml 三氯醋酸的离心管搅拌离心(1500 转/分)5 分钟,使血浆蛋白沉淀。


3.  准确吸取上清液各6 ml 分别置入试管内,每管加三氯化铁溶液0.6 ml(或12 滴)摇匀后即可显色。


4.  以药前管为对照,在分光光度计上,用波长510 nm,1 cm 光径比色皿进行比色,读给药后两管上清液的光密度(x1、x2)。


5.  根据下列公式求半衰期t =1/2

(x1、x2为药后两次血浓度的光密度,t为两次取血间隔时间)

展开 
注意事项

⒈  心脏取血:将兔仰卧,以左手拇指在胸骨一侧,食指及中指于胸骨另侧固定心脏,在心尖搏动最明显处将针与胸壁垂直刺入胸腔,当持针手感到心脏搏动时,再稍刺入心脏,然后抽出血液。取血时,宜用7—8 号针头,针头直出直入,勿在胸腔内左右探索。


⒉  为防止凝血,心脏取血时,注射器内先用0.5%肝素溶液湿润。

其他

一、测定药物的半衰期有何临床意义?


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