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体细胞融合实验

2019.11.12

  • 单层培养细胞的融合

  • 悬浮培养细胞的融合

           

实验材料

细胞

试剂、试剂盒

PEG-1000

仪器、耗材

培养基

实验步骤

1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度(80% 汇合率)。

2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基,加 2 ml 50% PEG-1000,轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。

3. 往培养皿或瓶中加 5 ml 完全培养基以稀释 PEG 溶液。

4. 吸净培养皿或瓶中的液体,再加 5 ml 培养基洗涮细胞,进一步稀释 PEG。

5. 再洗一次细胞,之后,加 5 ml 新培养基。

6. 细胞放回 37℃ CO2 培养箱,过夜。

7. 恰当地处理细胞:可以消化细胞并重新接种和/或进行生化筛选。

8. 筛选细胞:融合 12~24 小时后就可以进行异核体分析。

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