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体细胞融合实验

2020.8.17

实验材料 细胞


试剂、试剂盒 PEG-1000


仪器、耗材 培养基


实验步骤


1. 以适当的培养基培养细胞至接近汇合成片的密度(80% 汇合率)。


2. 吸干 60 mm 规格平皿或 T-25 培养瓶中的培养基,加 2 ml 50% PEG-1000,轻轻转动 1 分钟让该粘稠液体覆盖所有细胞。


3. 往培养皿或瓶中加 5 ml 完全培养基以稀释 PEG 溶液。


4. 吸净培养皿或瓶中的液体,再加 5 ml 培养基洗涮细胞,进一步稀释 PEG。


5. 再洗一次细胞,之后,加 5 ml 新培养基。


6. 细胞放回 37℃ CO2 培养箱,过夜。


7. 恰当地处理细胞:可以消化细胞并重新接种和/或进行生化筛选。


8. 筛选细胞:融合 12~24 小时后就可以进行异核体分析。


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