牛体内重组牛生长激素 (rbST) 快速高灵敏度检测（一）
牛体内重组牛生长激素 (rbST) 快速高灵敏度检测
Gaud Pinel1 ， Sandrine Roulet-Rochereau1 ， Marie-Hélène Le Breton1,2 ，
Sylvain Chéreau1 ， Fabrice Monteau1 ， Paul Silcock3 ，与 Bruno Le Bizec1
1 Laboratoire d’ Etude des Résidus et Contaminants dans les Aliments (LABERCA) ， ONIRIS ， Nantes ， France 法国 LABERCA 化学实验室
2 瑞士洛桑雀巢公司，雀巢研究中心
3 英国曼彻斯特沃特世公司
应用优势
牛注射了重组牛生长激素，过几天后检测药物在牛体内的残留。首次得到了明确的检测结果，可用于此类药物的使用监控。
■ Xevo TQ MS 的高灵敏度可准确检测生物基质中的重组牛生长激素（ rbST ），符合 2002/657/EC 要求。
■ 方法的灵敏度高，非常适合用于在给药几天后检测动物血液中痕量的残留激素药物。
■ Xevo TQ MS 提供重复性好的结果，且基质效应很低，这对于药物监控计划实施中的常规分析来说是十分重要的。
沃特世解决方案
■ ACQUITY UPLC ， Xevo TQ MS
关键词
■ rbST ， reST ，生长激素，食品安全
简介
动物性食品安全控制是政府、国际法规机构与组织的重要任务，应该在食品进入消费环节之前就对食品安全进行有效的检测和控制。因为上市后的食品安全事件可能影响消费者信心与国际贸易。
重组牛生长激素（ rbST ），又称为生长激素，在一些国家通常作为猪或牛的生长促进剂，将其用于乳牛可以增加牛奶产量 1,2 。然而，生长激素的使用有严格的法律规范，在欧盟国家是完全禁用的 3,4 。但是，这项法规的执行面临着很大的困难，主要是因为缺乏有效的分析工具来检测是否存在滥用该激素的情况。此分析的困难在于生长激素本身是蛋白质，且在生物基质中浓度较低，而样品基质组成又十分复杂。至今为止，分析方法仅仅局限为酶联免疫检测，这个方法不能将天然存在的激素与重组激素分离开来；尽管也有其它应用报导，但都不能专属性很强地检测生理水平的重组牛生长激素（ rbST ） 5,6 。
直到最近才开发出了一项直接检测生物基质中重组牛生长激素（ rbST ）的方法 7,8 ，这个方法是将重组生长激素用胰蛋白酶进行水解，然后分析生长激素专有的 N- 端肽链。事实上，天然激素的 N- 端氨基酸是丙氨酸，而重组激素的 N- 端氨基酸是甲硫氨酸。
此应用文章展示了使用 Waters® XevoTM TQ MS 分析注射了重组激素的动物血浆样品中的药物。在注射后几天进行检测，可清晰检测出结果，展示了一流水平。
实验部分
重组激素标准品
重组牛生长激素（ rbST ）标准品与重组马生长激素（ reST ）分别购自哈勃 UCLA 医学中心国家激素与垂体项目（美国托兰斯）以及 Bresagen 有限公司（澳大利亚 T hebarton ）。
样本制备
重组牛生长激素在血浆中的样本提取、纯化步骤依照文献进行。 7,8
MS 条件
MS 系统： XEVO TQ MS
离子化模式： ESI+
毛细管电压： 3 kV
源温度： 150 ℃
脱溶剂温度： 550 ℃
脱溶剂气速： 800 L / 小时
碰撞气流速： 0.15 mL/ 分
