western blot 在加荧光剂后，显影定影的时间及具体操作
如果免疫反应好，加荧光剂后在暗室里，可以看到很亮的条带。有时候，条带发光可以有半个小时之久。
所以在加荧光剂后，反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里，放好后再也不要移动膜，否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜，小心，铺展。将准备好的胶片放在膜上，放上去后也不要再移动了。然后压片。
可以依据最初看到的荧光亮度大概判定压片时间。一般可以看到明显的荧光条带，先压三十秒。显影时，要把胶片完全浸入显影液，可以用透明的或者白色的盒子，可以看到显影，当看到胶片上有黑色条带，基本上显影可以了。多放个几秒钟，可以捞出来了，过下清水，放定影液里就可以了。
如果你觉得显影的条带过浓，就再重新压一张，时间短一点。条带浅，就压时间长点。
如果加荧光剂后并没有直接看到条带，也可以压片，这时候可能要压蛮久的。我有试过压片两个小时，或者过夜，但是结果基本不能用。
还有，显影液最好不要重复用，且用过的不要倒回原液。我用的进口的显影液，结果为了节省，用后回收，几次之后一整瓶都坏掉了。定影液可以反复用，但是最好倒出后就不要再倒回去了。
wb是一个漫长而艰辛又枯燥的实验过程。
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