PCR扩增效率低的原因分析
(1)引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。
(2)反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。
(3)反应条件不够优化:可调整退火温度或改为三步扩增法。
(4)反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。
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(1)引物或探针不佳: 重新设计更好的引物和探针。
(2)反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。
(3)反应条件不够优化:可调整退火温度或改为三步扩增法。
(4)反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。