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PCR非特异性扩增的原因及处理办法

2022.10.19

原因:

    1、引物特异性差

    2、模板或引物浓度过高

    3、酶量过多

    4、Mg2+浓度偏高

    5、退火温度偏低

    6、循环次数过多

对策:

    1、重新设计引物或者使用巢式PCR

    2、适当降低模板或引物浓度

    3、适当减少酶量

    4、降低镁离子浓度

    5、适当提高退火温度或使用二阶段温度法

    6、减少循环次数


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