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关于血清脂蛋白-α测定的操作方法介绍

2023.5.29

  (1)包被:聚苯乙烯板,96孔。抗apo(a)-IgG用包被液稀释成10μg/ml浓度,每孔加150μg/ml,4℃过夜。

  (2)洗板及封闭:包被后的小孔用洗涤液洗3次,每次5min。每孔中加入封闭液0.15ml,37℃放置30min后,再用洗涤液洗3次。

  (3)稀释:参考血清1∶200稀释起,用稀释液倍比稀释8管,作标准曲线用。血清标本可稀释成1∶100或1∶2000后复查。

  (4)加样:每孔中加入稀释后的参考血清及标本各100μl,留空白孔只加稀释液,37℃1h可用洗涤液洗3次。

  (5)加酶标抗体(稀释度因抗体效价而定,例如1∶20000):每孔100μl,37℃1h。

  (6)显色:每孔中加底物溶液100μl,室温(25℃)避光放置15min。

  (7)终止反应:每孔中加入终止液50μl。

  (8)比色:在酶标比色计上以空白孔校零点比色,波长490nm,读取各孔吸光度(A)。

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