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密度梯度分离法分离单个核细胞(MNCs)

2020.7.13

试剂和材料:
1. 合适的培养基或冷冻液;
2. PBSA;
3. Ficoll-Hypague;
4. 巴氏吸管;
5. 50ml离心管;

实验方法:
1. 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释;
2. 将15ml Ficoll-Hypague吸入50ml离心管;
3. 将30mlPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到Ficoll-Hypague上;
4. 室温450g离心20-30min;
5. 离心后,在Ficoll-Hypague液面上明细可见一层细胞,是密度低于Ficoll-Hypague液的单个核细胞层;
6. 用巴氏吸管,将单个核细胞层吸出,转移到另一离心管中;
7. 用PBSA洗细胞,室温200g离心10min;
8. 倒掉上清,用PBSA重悬细胞,洗细胞,重复上述步骤7;
9. 最后,用合适的培养基重悬细胞(冰冻液或培养基);


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