果蝇的双因子杂交材料、原理和步骤
一、实验目的：
通过两对性状个体杂交，观察F2的分离现象及其比例，了解两对非等位基因间的自由组合。同时掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理方法。
二、实验材料：
灰体残翅 EEvgvg
黑檀体长翅 eeVgVg
三、实验原理：
果蝇的灰体基因（E）与黑檀体基因（e）为一对相对性状，位于ⅢR70.7位置，而长翅（Vg）与残翅（vg）为另一对相对性状，位于ⅡR67.0位置。这两对基因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。
根据非等位基因分离的自由组合定律，在F1代产生配子时，非等位基因的分离是独立的，它们彼此自由组合，产生四种基因型的配子（EVg，Evg，eVg，evg），且它们的比例相同。这四种配子自由结合，因此在F2代会出现9种基因型的后代，若显性完全，就出现4种表型，比例为9：3：3：1。
正交：灰体残翅（♀）×黑檀体长翅（♂）P
EEvgvg eeVgVg
↓
灰体长翅F1
EeVgvg
↓ 自交
F2
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EVg 1/4 |
Evg 1/4 |
eVg 1/4 |
Evg 1/4 |
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EVg 1/4 |
1/16 |
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Evg 1/4 |
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eVg 1/4 |
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Evg 1/4 |
四、实验内容：
1、 选处女蝇：每组做正交1瓶，正交选灰体残翅为母本，黑檀体长翅为父本，将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死，在8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5只黑檀体雄蝇转移到新的杂交瓶中，贴好标签，于25℃培养；
2、 7d后，释放杂交亲本； 3、 再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型；
4、 选取5对F1代果蝇，转入一新培养瓶，于25℃培养，其余F1代果蝇处死；
5、 7d后，处死F1亲本；
6、 再过5d，F2成蝇出现，开始观察记录，连续统计7d；
五、备注：
1、保证杂交所用的亲本雌果蝇一定是处女蝇；
2、杂交后倒掉亲本时，一定要倒干净，以免造成回交产生实验误差。同样在F1自交后，倒掉F1时一定要倒干净，以免造成F1和F2的混杂产生实验误差。
果蝇的双因子杂交实验
F1：
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观察结果 统计日期 |
灰体残翅（♀）×黑檀体长翅（♂） |
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灰体残翅数 |
灰体长翅数 |
黑檀体残翅数 |
黑檀体长翅数 |
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F2：
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观察结果 统计日期 |
（♀）× （♂） |
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灰体残翅数 |
灰体长翅数 |
黑檀体残翅数 |
黑檀体长翅数 |
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合 计 |
对F2代的统计结果做x2测验：
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灰体残翅数 |
灰体长翅数 |
黑檀体残翅数 |
黑檀体长翅数 |
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实际观察数（O） |
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预期数（E） |
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偏差（O-E） |
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(O-E)2/E |
自由度＝n－1＝
x2＝∑(O-E)2/E＝
