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原子吸收光谱仪检测血液中的血锰蛋白

2018.6.20

      摘要:血锰蛋白 即江跳球蛋白,存在于瓣鳃纲热带产裂江珧属的血液中,含有0。35%锰元素。该蛋白质为无色,但在空气中与氧结合可变为褐色。具有呼吸色素的性质。

      锰主要以烟尘的形式被人体吸入,也可通过胃肠道及皮肤侵入引起以神经系统改变为主的疾病。锰中毒目前尚无特异的诊断指标,血中锰含量的检验对预防和治疗锰中毒有一定的参考价值[1]。本文根据《生物材料分析方法的研制准则》的要求,提出了直接用石墨炉原子吸收分光光度法测定血中锰的方法。结果证明,该方法具有灵敏度高,准确度好,简便易行等特点。

       1 仪器及工作条件

      1.1 仪器 (1)原子吸收分光光度计(南京科捷分析仪器有限公司);锰空心阴极灯

      1.2 试剂 

      锰标准贮备液:1.00ml=1.00mg,由国家标准物质研究中心提供;

      (2)锰标准应用液:1.00ml=0.10μg,临用前用1%溶液稀释贮备液;

      (3)肝素钠水溶液:10g/L。

       1.3 样品的采集、运输和保存 采取0.1ml手指或耳垂的末梢血加入盛有0.4ml的溶液(1%)的具塞离心管中,离心后4℃下可保存2周。

       2 分析步骤

       2.1 标准曲线配制 取6支10ml比色管,分别加入0.1μg/ml锰标准应用液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0ml,用1%溶液定溶至10ml,配成浓度为0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00μg/L的标准系列。

       2.2 样品测定 将离心后的血样从冰箱取出,放置至室温供测定。

       3 结果与讨论

       3.1 灰化温度的选择 对锰浓度为10μg/L的样品,在同一原子化温度不同灰化温度下测定锰的吸光度,得出如下吸光度与灰化温度的关系曲线

       灰化温度为800℃~1200℃时被测成分没有明显损失的前提下干扰成分已被清除。本法灰化温度选择1000℃。

       3.2 原子化温度的选择 对锰浓度为10μg/L的样品,在同一灰化温度不同原子化温度下测定锰的吸光度,得出如下吸光度与原子化温度的关系曲线见图2。

       原子化温度在1800℃后锰的吸光度恒定,但过高的原子化温度会缩短石墨炉的使用寿命。本法原子化温度选择2000℃。

       3.3 基体改进剂的选择 基体改进剂可以减少或消除样品的背景干扰,提高测定的灵敏度和稳定性。

       本文试验了Mg(NO3)2、(NH4)H2PO4、PdCl2几种基体改进剂的使用效果,发现Mg(NO3)2不但能提高灰化温度,而且稳定性好,使用方便。

       3.4 线性范围和方法的检出限 随机制作6条标准曲线,其相关系数均>0.998。结果表明在0~15μg/L浓度范围内本方法线性良好。经过对标准系列零管20次的重复试验,标准偏差Sb=0.02,当K=3时,最小检出限为0.06μg/L。3.5 方法准确度和精密度 于正常样品中加入相当于浓度为2.0、6.0、8.0μg/L的锰标准溶液,连续测定6次计算均值。

       3.5 8.00 11.19 96.1 2.8

       3.6 小结 石墨炉原子吸收分光光度法可用于血中锰的测定。具有灵敏度高、检测限低、干扰较少、准确可靠等特点。

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