离子交换色谱中对流动相的要求
离子交换色谱中对流动相的要求
离子交换色谱展开剂的选择要依据被分离化合物的酸碱性,可用各种类型的缓冲液或盐溶液作为展开剂。选择展开剂的前提是根据被分离化合物是酸还是碱,是阴离子还是阳离子来选择。为了使这些离子型化合物得到较好的分离,点样前必须用水或0.1mol/L氯化钠溶液对薄层板展开一次,即可使离子交换薄层得到再生或活化。
由于水是优良的溶剂并具有电离性,因此大多数用离子交换树脂进行色谱分离时,都是在水溶液中进行的。有时亦采用水/甲醇混合溶剂,因为在水相展开剂中加入少量能与水混溶的有机溶剂可以增加样品组分的溶解度并且改变溶剂的分离选择性,还可以减少某些组分的拖尾现象。缓冲液用来控制展开剂的pH值,如在阳离子交换树脂中,经常采用醋酸、枸橼酸、磷酸缓冲液;在阴离子交换树脂中,则采用氨水、吡啶等缓冲液。另外也可通过加入某些盐类溶液来调节展开剂的离子浓度。
常用的离子交换色谱展开剂有四种类型:
①pH=3.0~8.0的各种离子强度的缓冲溶液,如pH8.0的0.005mol/L磷酸缓冲液或pH3.4的2mol/L氯化钾或氯化钠溶液;
②盐溶液,如0.1~2.0mol/L氯化钾或氯化钠溶液;
③蒸馏水;
④在上述各种展开剂中加入少量有机溶剂如甲醇、四氢呋喃、乙腈等。
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