食品中铅含量的测定
一、目的
1、掌握分光光度法测定食品中铅含量的方法。
2、熟悉样品处理方法。
二、原理
样品经消化后，在PH8.5-9.0时，铅离子与双硫腙生成红色络合物，溶于三氯甲烷，络合物颜色的深浅与样品中铅的含量成正比。反应式如下：
三、试剂
1.氨水(1＋1)：氨水与水等体积混合。
2.6mol/L盐酸：量取100ml盐酸，加水稀释至200ml。
3.酚红指示液：1g/L酚红乙醇溶液。
4.20%盐酸羟氨溶液：称取20g盐酸羟氨，加水溶解至约50ml，加2滴酚红指示液，加(1+1)氨水，调PH至8.5-9.0(由黄变红，再多加2滴)，用双硫腙-三氯甲烷溶液提取至三氯甲烷层呈绿色不变为止，再用三氯甲烷洗两次，弃去三氯甲烷层，水层加6mol/L盐酸呈酸性，加水至100ml。
5.20%柠檬酸铵溶液：称取50g柠檬酸铵，溶于100ml水中，加2滴酚红指示剂，加(1＋1)氨水调PH8.5-9.0，用双硫腙-三氯甲烷溶液提取数次，每次10-20ml至三氯甲烷层绿色不变为止，弃去三氯甲烷层，再用三氯甲烷洗两次，每次5ml，弃去三氯甲烷层，加水稀至250ml。
6.10%氰化钾溶液。
7.三氯甲烷：不应含氧化物。
检验方法：量取10mL三氯甲烷，加25mL新煮沸过的水，振摇3min，静置分层后，取10mL水液，加数滴15%碘化钾及淀粉指示液，振摇后应不呈兰色。
处理方法：在三氯甲烷中加入1/10~1/20体积地20%硫代硫酸钠溶液洗涤，再用水洗后加入少量无水氯化钙脱水后进行蒸馏，弃去最初及最后的蒸馏液，收集中间馏出液备用。
8.淀粉指示液：称取0.5g可溶性淀粉，加5ml水搅匀后，慢慢倒入100ml沸水中，随倒随搅拌，煮沸，放冷备用。
9.10g/L硝酸：量取1ml硝酸加水稀释至100ml。
10.双硫腙三氯甲烷溶液：保存冰箱中，必要时用下述方法纯化。
称取0.5g研细的双硫腙溶于50ml三氯甲烷中，如不全溶，可用滤纸滤于250ml分液漏斗中，用(1+99)氨水提取3次，每次100ml，将提取液用棉花过滤至500ml分液漏斗中，用6mol/L盐酸调至酸性，将沉淀出的双硫腙用三氯甲烷提取2~3次，每次20ml，合并三氯甲烷层，用等量水洗涤两次，弃去洗涤液，在50℃水浴上蒸去三氯甲烷。精制的双硫腙置硫酸干燥器中，干燥备用。或将沉淀出的双硫腙用200、200、100ml三氯甲烷提取三次，合并三氯甲烷层为双硫腙溶液。
11.双硫腙使用液：吸取1.0ml双硫腙溶液，加三氯甲烷至10ml混匀。用1cm比色杯，以三氯甲烷调零点，于波长510nm处测吸光度(A)，用下式算出配制100ml双硫腙使用液(70%透光率)所需双硫腙溶液的毫升数V。
V= (3-14)
12.铅标准溶液：精密称取0.1598g硝酸铅，加10ml 1%硝酸，全部溶解后，移入100ml容量瓶中并加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于1mg铅。
13.铅标准使用液：吸取1.0ml铅标准液移入100ml容量瓶中，加水稀释至刻度。此溶液每毫升相当于10μg铅。
四、操作方法
1.样品处理：
(1)硝酸—硫酸消化法：根据样品含水分的多少来确定取样量的不同。含水分较多的果蔬类称取25.0~50.0g洗净并打成匀浆的样品；饮料类可吸取10.0~20ml样品；含水分较少的固体样品可吸取5.0~10.0g的粉碎样品
将试样转移入250~500ml定氮瓶中，对干燥的试样可先加少许水湿润。加数粒玻璃珠、10~15ml硝酸，放置片刻，在通风橱内小火缓缓加热，待作用缓和，放冷。沿瓶壁缓慢加入5ml或10ml硫酸，再继续加热，至瓶内液体开始变成棕色时，不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全。加大火力，至产生白烟，此时溶液应透明并无色或微带黄色，放冷。在消化过程中应注意控制热源强度。
在瓶中加入20ml水并煮沸，至产生白烟为止(除去残余的硝酸)，如此处理两次，冷却。将溶液移入50ml或100ml容量瓶中，用水洗涤定氮瓶，洗液并入容量瓶中，冷却后加水至刻度，混匀。此液每10ml相当于1~5g样品，相当加入硫酸量1ml。
取与消化样品相同量的硝酸和硫酸，按同一方法作试剂空白试验。
(2)灰化法：称取5.0g或吸取5.0ml样品(液体样品应先在水浴上蒸干)置于坩埚中，加热至炭化。在高温炉内灰化3h，取出放冷后，加入1ml硝酸润湿灰分，用小火蒸干，在550℃下灼烧1h，放冷，取出坩埚。然后加入1ml(1+1)硝酸，加热使灰分溶解，移入50ml容量瓶中，用水洗涤坩埚，洗液并入容量瓶中，加水至刻度，混匀备用。
2.测定
吸取10.0ml消化液和相同量的试剂空白液，分别置125ml分液漏斗中，各加水至20ml。分别依次加入200g/L柠檬酸铵溶液20ml、200g/L盐酸羟胺溶液1ml和2滴酚红指示液，用(1+1)氨水调至红色，再各加100g/L氰化钾溶液2ml，混匀。各加入5.0ml双硫腙使用液，剧烈振摇1min，静置分层后，将三氯甲烷层经脱脂棉滤入1cm的比色杯中，以零管调节零点，在波长510nm处测吸光度。吸取0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50ml铅标准使用液(相当0、1、2、3、4、5μg铅)，分别置于125ml分液漏斗中，各加入1%硝酸溶液至20ml。以下按样品溶液依次处理，然后分别测定吸光度，绘制标准曲线。
五、结果计算：
X= (3-15)
式中：X—样品中铅的含量，mg/kg或mg/L；
A1—测定用样品消化液中铅的含量，μg；
A2—试剂空白液中铅的含量，μg；
m—样品质量(体积)，g(ml)；
V1—样品消化液的总体积，ml。
V2—测定用样品消化液的总体积，ml。
注意事项：
1.双硫腙 学名二苯基硫卡巴腙(Dithizone，又名：打萨腙，二苯磺腙等。代号H2Dz或Dz)。
蓝黑色或紫色结晶粉末，难溶于水，能溶于碱性水溶液中，可溶于大多数有机溶剂中，并呈绿色。
双硫腙能与许多金属形成络合物，这些络合物能溶于三氯甲烷或四氯化碳并且呈现颜色。若控制一定的反应条件，则可提高双硫腙对重金属的选择性，常用的控制方法是控制溶液PH值或加入适当的掩蔽剂，从而可用双硫腙比色法对食品中的多种微量矿物质元素进行测定。
市售的双硫腙常含有氧化生成的二苯硫卡巴二腙，此化合物不与金属元素形成络合物，但能溶于氯仿或四氯化碳呈黄色或棕色，干扰测定，因此对市售双硫腙要进行提纯处理。方法如下：
称取1g双硫腙，加入200ml四氯化碳或氯仿使其溶解，移入500ml分液漏斗中，加入(1+100)氨水溶液200ml，振摇数次，此时双硫腙在氨水溶液中，氧化物残留在有机溶液中。再用(1+100)氨水溶液对有机溶液层进行数次提取，至氨液不变橙色为止。合并氨水层，加(1+1)盐酸中和并使其呈酸性，此时双硫胺沉淀析出，再加入四氯化碳或氯仿20ml抽提3次，收集抽提液于另一分液漏斗中，用水洗涤数次，将抽提液移入三角瓶中，先回收四氯化碳，再在水浴上蒸去残留的四氯化碳，在干燥器内干燥备用。
2.纯双硫腙(或其溶液)应在低温(4~5℃)下避光保存以免被氧化。
3.在测定过程中，溶液的PH值对其影响较大，应控制PH8.5~9.0内。
4.所用试剂应尽可能作提纯处理。柠檬酸铵、双硫腙必须提纯，其余试剂可根据试剂等级或通过空白试验，再决定是否需要提纯。
5.仪器在使用之前，应用10%~20%硝酸处理，再用无铅水冲洗，以防止其对结果的影响。
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
仪器推荐
-
焦点事件
-
政策法规
