骨桥蛋白的基因结构
OPN人的OPN基因定位在染色体4q13，是单一编码基因，8kb大小，具有7个外显子和6个内含子组成。小鼠位于5号染色体上，基因长约7Kb，包括7个外显子，其5’端有启动子序列，该启动子中IKb长度也被测序并用GCG程序分析了转录因子的可能识别部位，这些转录因子包括API-5、PEA-3、PEA-1、Ets等。
OPN基因结构的变异性较大。OPN本身是多等位基因，在小鼠有3个等位基因，人类至少有2个等位基因。通过比较分析，发现尽管不同种属甚至同一种属不同组织的OPN基因具有一定的多态性，其总体核苷酸序列还是呈中度保守性，其中编码N末端和C末端以及含RGD序列的50个氨基酸区具有高度序列保守性。
OPN启动子包括1个TATA盒(-28-22)、1个颠倒的CCAAT盒(-55-50)及1个GC盒及多种转录因子的结合位点。API结合部位是高度保守的增强子样元件。OPN基因启动子上含有多个应答元件，如VitD反应元件，糖皮质激素反应元件，Ras反应元件，激活蛋白(AP)21结合位点等。
离心脱脂后的牛乳，采用离子交换层析，疏水层析,透析等生物化学技术进行分离纯化，然后对分离纯化得到的产物进行SDS-PAGE电泳，免疫印迹技术初步鉴定，得到相对分子量约为60kDa,具有活性的骨桥蛋白。主要阐述牛乳中骨桥蛋白的分离纯化及初步鉴定的方法，为骨桥蛋白功能性质的研究奠定了基础。
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