NLＲP3 在博来霉素致大鼠肺纤维化中的作用
NLＲP3 在博来霉素致大鼠肺纤维化中的作用
孙云晖，王一新，马雪梅，章 婷，赵艳景
( 佳木斯大学 临床医学院，黑龙江 佳木斯 154003)
摘要: 目的: 探讨
NLＲP3 在博来霉素致大鼠肺纤维化中的作用及意义。方法: 将 60 只清洁级大鼠随机分为对照组( N 组) 、博来霉素组( B 组)
、地塞米松组( D 组) ，B、D 组大鼠气管内给予 4 mg / kg 博来霉素制作肺纤维化模型，N 组给予相同体积生理盐水作为对照，D
组大鼠于肺纤维化造模基础上第 2 天每日腹腔注射地塞米松 3 mg / kg，N、B 组大鼠腹腔注射生理盐水作为对照。各组分别于造模后第
1、7、14、28 天处死大鼠，HE 染色观察大鼠肺组织病理形态学变化，ELISA 法测定各组大鼠肺组织不同时间点 NLＲP3 含量。结果:
NLＲP3 在 N 组呈低表达，B、D 组 NLＲP3 含量较 N 组明显升高，且于第 7 天达高峰后逐渐降低( P ＜ 0. 05) 。结论:
NLＲP3在肺部炎症及肺纤维化形成密切相关。
关键词: NLＲP3; 大鼠; 肺纤维化
中图分类号: Ｒ563． 1 + 3 文献标识码: B 文章编号: 1005 － 5320(2018)02 － 封二 － 01
肺纤维化是间质性肺炎中*常见的一种，高发于老年人群，以胸膜下肺基底部分布为主，HＲCT
上可表现为数量不等、范围有限的磨玻璃影及网格影［1］。近年来研究发现，肺组 织损伤可导致组织蛋白酶及 ＲOS 大量释放，诱导炎症小体(
NLＲP3) 高表达，参与慢性炎症形成。本实验采用大鼠气管滴注博来霉素制作肺纤维化模型，探讨 NLＲP3
在博来霉素致大鼠肺纤维化中的表达及作用机制。
1资料与方法
1． 1 一般资料
健康清洁级 Wistar 大鼠 60 只( 雌雄各半) ，6 周龄，体重 180 ～ 220 g，由哈尔滨医科大学实验动物学部提供。主要试剂及仪器: HE 染色试剂( 湖北锦源医疗科技有限公司) ，NLＲP3大鼠 ELISA 试剂盒( 上海恒远生物科技有限公司) 。
1． 2 实验方法
10%
水合氯醛( 3． 5 ml / kg) 腹腔注射将 Wistar 大鼠麻醉后，仰卧固定于鼠板上，剪去颈毛并消毒皮肤，无菌操作下作 长约 1
cm 的颈中切口，逐层分离暴露气管，弯眼科钳经气管下方穿过，轻抬气管，直视下用 1 ml 注射器针头穿刺两软骨环间，抬高鼠板头端，使与桌面成
30 ～ 35 度角。保持针头与气道方向一致，并尽可能在气道中央，B、D 组以 4 mg / kg
剂量一次性快速推注博莱霉素至气管，对照组给予生理盐水。立即拔出针头，保持大鼠直立体位，左右来回旋转 1 ～ 2
min，使药液尽可能到达两侧肺部并均匀分布。手术后缝合皮肤，置 于动物室喂养。D 组大鼠于肺纤维化造模基础上第 2 天每日腹腔注射地塞米松 3
mg / kg，N、B 组大鼠注射生理盐水作为对照。分别于造模后第 1、7、14、28 天处死大鼠。HE 染色观察大鼠肺组织病理变化，ELISA
法检测肺组织IL － 37 水平，严格按照试剂盒说明书进行操作。
1.3 采用 SPSS22． 0 软件进行分析
实验结果采用( x珋± s) 描述，组间多重比较应用 LSD － t 检验，以 P ＜ 0. 05 为差异有统计学意义。
2结 果
2.1 大鼠肺组织病理观察结果
N 组大鼠肺组织气道上皮光滑，无炎性细胞渗出，肺泡壁正常，无纤维化改变。B 组与 N 组相比，气管周围炎细胞浸润，肺组织大量结构破坏，肺泡间隔明显增宽，胶原纤维沉积，
收稿日期: 2017 － 04 － 21
基金项目: 佳木斯大学校级面上项目( JMSUJCMS2016 － 049) ; 佳木斯大学研究生科技创新项目医药类重点项目( YZ2016 － 019)
作者简介: 孙云晖( 1970 － ) ，女，主任医师，硕士，硕士研究生导师。通讯作者: 王一新，在读硕士研究生。
肺组织呈明显纤维化改变。D 组与 B 组比较，纤维化程度减轻，肺泡间隔增厚减轻。
2． 2 NLＲP3 在大鼠肺组织中含量
NLＲP3
在 N 组呈低表达，造模后第 1 天各组 NLＲP3 含量无差异( P ＞ 0. 05) ，于第 7、14、28 天，B、D 组 NLＲP3
含量较 N组明显升高，且于第 7 天达高峰后逐渐降低( P ＜ 0. 05) ，B 组 NLＲP3 含量明显高于 D 组，差异有统计学意义( P
＜ 0. 05) ，见表 1。
表 1 NLＲP3 在大鼠肺组织匀浆中含量(( pg / ml)
组别 1 天 7 天 14 天 28 天
N 43． 48 ± 1． 90 42． 72 ± 0． 86 43． 21 ± 1． 27 43． 13 ± 0． 20
B 46． 06 ± 0． 92 69． 39 ± 0． 66 62． 21 ± 0． 69 55． 24 ± 0． 74
D 45． 38 ± 0． 64 64． 60 ± 0． 71 58． 10 ± 1． 56 47． 90 ± 2． 56
F 2． 67 724． 95 284． 81 29． 27
P ＞ 0． 05 ＜ 0． 05 ＜ 0． 05 ＜ 0． 05
注: P ＜ 0. 05 表示差异有统计学意义。
3讨 论
肺纤维化是多种肺部疾病的*终表现，主要表现为弥漫
性间质性改变，随着年龄增长发病率越高，预后极差，严重影 响患者的生存质量［2］。因此研究肺纤维化发生发展机制尤为 重要。已有研究报道 IL －
18 可诱导和上调 TNF － ɑ 的表达， 而 TNF － ɑ 与肺纤维化和间质性炎症有关［3］。当 NLＲP3 被激活后，可以大量诱导
IL － 18 的产生，从而加重肺部炎症及肺纤维化的进展。本研究发现，与正常组比较，NLＲP3 含量于第 7 天达高峰，后逐渐缓慢降低，B
组*为显著( P ＜ 0. 05) ，提示 NLＲP3 参与早期的炎症反应，并从而导致肺内肉芽肿及肺纤维化形成，因此，抑制 NLＲP3
的信号转导，可能是抑制肺纤维化的有效手段。
参考文献:
［1］ 蔡后荣． 2011 年特发性肺纤维化诊断和治疗循证新指南解读［J］． 中国呼吸与危重监护杂志，2011，10( 4) : 313 － 316．
［2］ 梁丽娟，梁立荣，代华平． 特发性肺间质纤维化患者生活质量评价量表研制［J］． 中国中西医结合杂志，2016，36 ( 6) : 668 － 673．
［3］ 李 才． 器官纤维化基础与临床［M］． 北京: 人民卫生出版社，2003． 195 － 196．
