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罗丹明的基本特性

2023.2.10

1. 外观:红棕色粉末

2. 纯度:≥95% (HPLC)

3. 产品描述:Rhodamine 123是一种可以通过细胞膜的选择性染色活细胞线粒体的荧光染料,呈黄绿色荧光。广泛用作检测线粒体膜电位,也常用于细胞凋亡检测。它可以快速通过细胞膜,仅需几分钟就可以被具有活性的线粒体所俘获,并且对细胞没有任何毒性。

Rh123用于对许多种细胞进行染色,包括植物细胞和细菌。由于细胞内ATP的量与Rh123的荧光强度之间有相关性,因此Rh123被应用于检测细胞内的ATP。Rh123还用于癌症研究。

Rh123的最大激发波长为507nm,最大发射波长为529nm。

4.染色程序:

(1) 将0.4mgRh123溶解到1mL DMSO中制备成1mMRh123-DMSO溶液。

(2) 用载玻片准备细胞。细胞数目应为5×104~5×105个/mL。

(3) 孵育该载玻片,用PBS或Hank's液洗涤细胞。

(4) 用培养基稀释1mM Rh123溶液以制备1~20µM Rh123缓冲液。

(5) 将Rh123缓冲液加入载玻片并在37℃下孵育30分钟至1小时。

(6) 去除Rh123缓冲液并用培养基洗涤细胞(洗涤细胞后为了固定,加入10%福尔马林缓冲液并孵育15~20分钟,接着用PBS洗涤)。

(7) 用带有荧光素滤光片的荧光显微镜观察细胞。

储存条件:室温避光保存,溶于DMSO配制成母液后-20℃保存。


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