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胶束薄层色谱法

2018.7.25

胶束薄层色谱法


胶束色谱是一类应用一定浓度的表面活性剂溶液所形成的胶束溶液作为流动相的色谱。自1979年美国科学家Armstrong首次采用胶束薄层色谱法成功地分离测定农药后,胶束色谱法在理论和实践上均取得了显著进展。表面活性剂分子的化学结构包括亲水基和疏水基,如十二烷基硫酸钠。在极性溶剂如水中,由于和极性亲水基(硫酸基)之间有排斥作用,非极性疏水基(烷基长链)之间有缔合作用,故几十个表面活性剂分子聚合成团,形成亲水基向外、疏水基向内的正胶束;而在非极性溶剂中情况则相反,极性基团聚集成亲水性内核,而亲脂性的非极性基团向着外部的有机溶剂,形成逆胶束。正胶束溶液对于原来不溶或微溶于水的有机化合物有增溶作用。对于苯、甲苯这类非极性分子,由于分子溶解在胶束的亲脂性内核中,故溶解度增加;对于水杨酸、酚类等稍带极性的分子,分子的非极性部分插入胶束内核,极性部分伸在外层亲水基团中间,结果同样造成增溶;而羧基苯甲酸这种强极性分子,则可吸附在胶束的亲水基表面而得到增溶。由于胶束的增溶作用,用胶束溶液作为色谱流动相时,原来组分在液固两相间的分配变成了组分在胶束、水相和固定相三相问的分配平衡。各组分之间因分配系数不同,而达到分离。


胶束薄层色谱根据所用胶柬溶液的不同又可分为正胶束薄层和逆胶束薄层。正胶束薄层一般采用聚酰胺、氧化铝、硅胶作固定剂,表面活性剂的水溶液,如十二烷基硫酸钠水溶液等作展开剂,而逆胶束薄层一般采用硅烷化的硅胶作固定相,表面活性剂的有机溶液加入少量水,如丁二酸二辛酯磺酸钠的环己烷溶液中加入少量水后作展开剂,可解决其分离效率不高或斑点略有拖尾等问题。采用正胶束薄层色谱,可以用胶束溶液代替有机溶液展开分离许多原来在水中不溶或微溶的药物,既可避免使用挥发性大、对人体有害的有机溶剂,又能降低成本。


胶束色谱还可用于薄层扫描,又称为胶束薄层色谱扫描法;类似的还有胶束高效液相色谱和胶束电动毛细管色谱。


胶束高效液相色谱大多采用反相色谱柱LC-18、LC-CN等,流动相多用SDS水溶液或用其他表面活性剂水溶液。用胶束高效液相色谱分析血浆样品时,因血浆蛋白大分子不能像脂溶性药物小分子一样进入胶束内部,故会首先洗脱出峰。因此采用胶束色谱能使体液样品不经前处理直接进样。胶束色谱的这种特点已在生物样品中的药物及代谢物测定上得到了广泛应用。


胶束电动毛细管色谱是一种基于胶束增溶和电泳移动的新型色谱。当样品进入毛细管后,在水相和胶束相中进行分配,在水相中分配较多的组分移动速度快,在胶束相中分配较多的组分移动速度慢。因此,各种组分可以根据它们在两相中分配不同而得到分离。胶束电动毛细管色谱的特点在于它弥补了普通电泳法不能分离中性化合物的不足,可用于许多电中性药物的分离测定。


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