薄层色谱法的的操作步骤
操作步骤
①薄层板制备:除另有规定外,将1份固定相和3份水在研钵中向一方向研磨混合,去除表面的气泡后,倒入涂布器中,在玻板上平稳地移动涂布器进行涂布(厚度为
0.2~O.3mm),取下涂好薄层的玻板,置水平台上于室温下晾干,后在110℃烘30min,即置有干燥剂的干燥箱中备用。使用前检查其均匀度(可通过透射光和反射光检视)。
②点样:除另有规定外,用点样器点样于薄层板上,一般为圆点,点样基线距底边2.Ocm,样点直径及点间距离同纸色谱法,点间距离可视斑点扩散情况以不影响检出为宜。点样时必须注意勿损伤薄层表面。
③展开:展开室如需预先用展开剂饱和,可在室中加入足够量的展开剂,并在壁上贴二条与室一样高、宽的滤纸条,一端浸入展开剂中,密封室顶的盖,使系统平衡或按正文规定操作。将点好样品的薄层板放入展开室的展开剂中,浸入展开剂的深度为距薄层板底边0.5~1.Ocm(切勿将样点浸入展开剂中),密封室盖,待展开至规定距离(一般为10-15cm),取出薄层板,晾干,按各品种项下的规定检测。
④显色:取出的薄层板,立即喷洒显色剂,使其显色,计算Rf值或使之出现各种有色的斑点,与标准进行对照比较,可确定其成分。
推荐