细胞凋亡的形态：生化性质实验——吖啶橙染色
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1b)将1μL的染色混合液放至12 mm×75 mm的玻璃试管的底部。加入25μL细胞悬浮液，转动手腕轻柔地混合。 2b)将10μL的该混合液放在一干净的显微镜载玻片上，盖上22 mm2的盖玻片。用一 落射光显微镜的40×到60×的干物镜和一适合观察荧光素的滤光片结合起来检查。 3b)计数至少200个细胞，记录正常和凋亡的细胞核的数量。 活的和死亡的非凋亡的细胞核呈现荧光绿色，而且有「结构」；荧光强度变化反映常染色质和异染色质的分布。而凋亡的核，在核周边有很高的浓缩的半月斑；另外，整个核表现为一个或一群无特色的、明亮的、球状的颗粒。更进一步的凋亡，细胞会失去DNA或被弄碎成「凋亡小体」，而且整体的明亮度低于正常细胞。 4b)计算凋亡细胞的百分比（凋亡指数）如下： 凋亡细胞%=(细胞总数-活细胞总数)/细胞总数×100% 展开 |
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