Percoll梯度法染色实验
实验材料：染色质
试剂、试剂盒：精胺、精咪、Percoll、溶液
仪器、耗材：聚碳酸酯离心管
实验步骤：
1. 在体积为 10 ml 分离得到的染色质物质中加入精胺和精咪至终浓度分別为 0.8 mmol/L 和 2 mmol/L。
2. 加入 10 ml Percoll 溶液，匀浆分离得到的染色质。
Percoll 溶液：
89% (v/v) Percoll
5 mmol/L Tris-HCl ( pH 7.4)
2 mmol/L EDTA
0.8 mmol/L 精胺
2 mmol/L 精咪
0.1 % 毛地黄皂苷
3. 再加 15 ml Percoll 溶液到匀浆中，充分混匀。
4. 将 35 ml 的 Percoll 混合物加入 50 ml 的聚碳酸酯离心管中，用一固定角度转头（Beckman Instruments) 在 4℃，20000 r/min 离心 30 分钟。
5. 吸出染色体带上面的全部物质，将梯度中的染色体回收于大约 10 ml 的 Percoll 溶液中。
6. 为了除去 Percoll 颗粒，以 1:2 比例用稀释缓冲液稀释染色体，1400 g 离心 45 分钟进行浓缩。
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