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病原微生物染色实验——抗酸杆菌

2019.4.06
实验方法原理

结核杆菌和麻风杆菌通常称为抗酸杆菌,由于菌体内含有脂质蛋白质和多糖类物质,并由糖脂形成一个蜡质的外壳,当染色剂结合形成复合物后,用含酸分化剂处理也不易脱色,具有抵抗酸的作用,所以被称为抗酸杆菌。常用 Ziehl-Neelsen 抗酸杆菌染色法。

实验材料

石蜡组织切片

试剂、试剂盒

二甲苯无水乙醇中性树胶蒸馏水碱性复红石炭盐酸酸

仪器、耗材

滴管

实验步骤


石炭酸-复红液:碱性复红 1 g,纯乙醇 10 ml,石炭酸(5%)水溶液 100 ml,碱性复红溶于乙醇内,然后与石炭酸水溶液混合,用前过滤。


1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。


2. 浸入石炭酸-复红液 1 h,于 37℃ 或 56℃ 温箱内 30 min。


3. 自来水洗,蒸馏水 1 min。


4. 用 0.5% 盐酸乙醇液分化,浸入自来水洗 1 min。


5. 蒸馏水洗,0.1% 亚甲蓝水溶液处理 1 min。


6. 蒸馏水 1 min,95% 乙醇快速分化。


7. 无水乙醇脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。

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注意事项


1. 石炭酸-复红液染色后,注意盐酸乙醇分化适中,必要时在显微镜下观察。


2. 亚甲蓝(美蓝)染色应浅些,便于对比清楚。

其他

结果:抗酸杆菌呈红色,细胞核呈蓝色。


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