酵母菌细胞的诱变实验——紫外光诱变
| 实验材料 | |
|---|---|
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. 将过夜培养的酵母菌培养液接种到5 ml YPD培养基中，于30℃培养。离心5~10 s，用1 ml 无菌水重悬沉淀细胞，重复洗涤1次，再用1 ml 无菌水重悬。
2. 检查细胞密度，记录数据后将细胞密度调整到2×108细胞/ml。用无菌水系列稀释细胞悬液，最终确定在平板上生长出100~200个菌落的稀释度。在平板上分别涂布0.1 ml 和0.2 ml 释的菌悬液。
4. 作为对照，将0.1 ml 未诱变的菌悬液涂布于2块同样的刀豆氨酸平板上，按步骤3测定的时间照射其中一块平板，从抗刀豆氨酸的菌落计算经UV照射或未经UV照射所得到的突变频率。
5. 在23℃培养步骤2中的平板，直到生长菌落为止，筛选温度敏感突变株。 展开 |
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