枯草芽孢杆菌的紫外线诱变选育实验
实验方法原理 紫外线对微生物有诱变作用，主要引起是DNA的分子结构发生改变（同链DNA的相邻嘧啶间形成共价结合的胸腺嘧啶二聚体），从而引起菌体遗传性变异。
实验材料 枯草芽孢杆菌
试剂、试剂盒 生理盐水培养基
仪器、耗材 血球计数板显微镜紫外线灯电磁搅拌器离心机
| 实验步骤 | 一、实验主要仪器设备和材料 仪器：血球计数板、显微镜、紫外线灯（15W）、电磁搅拌器、离心机。 菌种：枯草芽孢杆菌。 二、实验方法、操作步骤 1. 菌悬液的制备 （1）取培养48小时的枯草芽孢杆菌的斜面4-5支，用无菌生理盐水将菌苔洗下，并装入盛有玻璃珠的小三角烧瓶中，振荡30分钟，以打碎菌块； （2）将上述菌液离心（3 000 r/min，离心15分钟），弃去上清液，将菌体用无菌生理盐水洗涤2-3次，最后制成菌悬液； （3）用显微镜直接计数法计数，调整细胞浓度为每毫升108个。 2. 平板制作 3. 紫外线处理 （1）将紫外线灯开关打开预热约20分钟。 （2）取直径6 cm无菌平皿2套，分别加入上述菌悬液5 ml，并将无菌搅拌棒放入于平皿中。 （3）将盛有菌悬液的2套平皿置于磁力搅拌器上，在距离为30 cm，功率为15 W的紫外线灯下分别搅拌照射1分钟及3分钟。 在红光下，将上述经诱变处理的菌悬液以10倍稀释法稀释成10-1-10-6（具体可按估计的存活率进行稀释）。 4. 涂平板 5. 培养 将上述涂匀的平板，用黑布（或黑纸）包好，置37 ℃培养48小时。注意每个平皿背面要标明处理时间和稀释度。 6. 计数 7. 观察诱变效应 将细胞计数后的平板，分别向菌落数在5-6个左右的平板内加碘液数滴，在菌落周围将出现透明圈。分别测量透明圈直径与菌落直径并计算其比值（HC值），并与对照平板进行比较，根据结果，说明诱变效应。并选取HC比值大的菌落移接到试管斜面上培养。此斜面可作复筛使用。 三、实验结果 1. 将实验结果填入下表 |
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