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马丁氏培养基的制备

2020.8.18

实验方法原理

马丁氏培养基是一种用来分离真菌的选择性培养基。此培养基是由葡萄糖、蛋白胨、K2HPO4、MgS04·7H2O、孟加拉红(玫瑰红,Rose Bengal)和链霉素等组成,其中葡萄糖主要作为碳源,蛋白胨主要作为氮源,K2HPO4、MgS04·7H2O作为无机盐,为微生物提供钾、磷、镁离子。

这种培养基的特点是培养基中加人的孟加拉红和链霉素能有效的抑制细菌和放线菌的生长,而对真菌无抑制作用,因而真菌在这种培养基上可以得到优势生长,从而达到分离真菌的目的。

试剂、试剂盒 葡萄糖蛋白胨K2HPO4MgS04·7H2O孟加拉红链霉素琼脂

仪器、耗材 试管三角烧瓶烧杯量筒玻棒培养基分装器天平牛角匙高压蒸气灭菌锅

实验步骤

一、马丁氏培养基配方

此培养液1 000 ml加1%孟加拉红水溶液3.3 ml。
 
临用时以无菌操作在100 ml培养基中加入1%的链霉素0.3 ml使其终浓度为30 μg/ml。

二、器材
 
1.  溶液或试剂

K2HPO4,MgS04·7H2O,蛋白胨,葡萄糖,琼脂,孟加拉红(1%的水溶液), 链霉素(1%水溶液)。
 
2.  仪器或其他用具

试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,天平,牛角匙,高压蒸气灭菌锅等。
 
三、操作步骤
 
1.  称量和溶化
 
按培养基配方,准确称取各成分,并将各成分依次溶化在少于所需要的水量中。将各成分完全溶化后,补足水分到所需体积,再将孟加拉红配成1%的溶液,在1 000 ml培养基中加人1%的孟加拉红溶液3.3 ml,混匀后,加人琼脂加热溶化(方法同马丁氏培养基的制备实验)

2.  分装、加塞、包扎、灭菌、无菌检查

与马丁氏培养基的制备实验相同。
 
3.  链霉素的加人
 
将链霉素配成1%的溶液,在100 ml培养基中加1%链霉素液0.3 ml,使每毫升培养基中含链霉素30 μg。
 
由于链霉素加热容易分解,所以使用时,将培养基溶化后待温度降至45-55 ℃时才能加入。


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