非整合型慢病毒——新型基因研究工具
常规慢病毒载体能高效感染分裂细胞和非分裂细胞，将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而实现持久性表达。然而这种随机整合会带来插入突变的风险。于是，研究人员也期望用到非整合型的慢病毒包装系统。
百恩维生物对整合酶蛋白进行突变，推出了整合酶缺陷型的慢病毒包装系统（非整合型慢病毒）。非整合型慢病毒在目的细胞中产生了环状附加体，这些载体在分裂细胞中瞬时表达，但在非分裂细胞中稳定表达。与整合型慢病毒相比，非整合型慢病毒导致插入突变的风险大大降低，适合iPS研究、RNA干扰、同源重组等领域。
非整合型慢病毒包装系统属于第四代的包装系统，它将pol基因也分离出来，使gag、pol和env成为三个独立载体，而不是两个载体，从而大大降低了产生具有复制能力的病毒的可能性，进一步提高了生物安全性。此系统与其他慢病毒载体配套使用可以制备出高滴度的慢病毒颗粒，无需浓缩即可达到 5x108 IU/ml。之所以能制备高滴度的病毒颗粒，主要有以下三个关键因素。
首先，非整合型慢病毒系统中各载体的比例是经过优化的，极大地提高了病毒包装所需蛋白的表达量。其次，引入了Tet-Off转录激活子(tTA)，形成病毒包装蛋白的级联放大表达效应，极大地提高了病毒包装蛋白的表达量。第三，百恩维生物拥有转染效率高极高的转染试剂，可以高效地转染Lenti-X 293T包装细胞系，制备出高滴度的慢病毒颗粒。本系统可以与任何慢病毒表达载体相兼容。
非整合型慢病毒主要优点：
• 高效的基因转导，不会插入宿主基因组
• 插入突变的风险低
• 采用VSV-G包膜，宿主范围广泛
• 分裂细胞中的瞬时表达，非分裂细胞中的稳定表达
• 与任何慢病毒载体配套使用，产生非整合型的慢病毒
• 产生高滴度慢病毒
简而言之，非整合型慢病毒高表达目的基因，又不会引起突变，是一种非常有效的基因研究工具。
作为病毒包装领域的佼佼者，百恩维生物还有逆转录病毒，是基因研究技术服务的理想选择。
来源：百恩维生物科技有限公司
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