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药理学的实验设计原则

2020.2.03

由于生物学研究普遍存在的个体差异,要取得精确可靠的实验结论必须进行科学的实验设计,因此必须遵循以下基本原则。

1、对照原则(control)

对照是比较的前提,为消除无关因素对实验结果的影响,实验中必须设立对照组,保证实验结果的可比性和实验结论的正确性,对照应符合齐同可比的原则,除试验药物和处理的差别外,实验动物要求性别、年龄相同,体重相近,实验室温度的把控要一致,还需相同的操作手法,根据实验研究的目的和需求不同,常有的对照方法有正常对照、阳性对照、阴性对照、自身对照等。

在一些涉及免疫学或者抗体的实验时,往往需要添加同型对照(Isotype control),或者说同型抗体对照。同型抗体是指和实验组的一抗具有相同动物来源(小鼠等)、相同抗体类别(IgG1、IgG2、IgG4等)的非特异抗体。例如下图我们百奥赛图将IgG4抗h4-1BB抗体注射到纯合的h4-1BB小鼠中。在给药第14和21天收集血样,并通过血液生化测试进行分析。
 



 

给药第14天后,两组之间的ALT和AST浓度无显着差异。给药第21天后,与对照组(G2)相比,大剂量Urelumab(G3)治疗后ALT浓度显着增加,但各组之间AST浓度没有显着差异。

2、随机化原则(randomization)

随机化(randomization)是指按照机遇均等的原则进行抽样或分组,使各受试对象被分配到各组的机会均等,而不受主观因素的影响。其目的是使一切干扰因素造成的实验误差减少,而不受实验者主观因素或其他偏性误差的影响。

1)单纯随机:所有个体(动物)完全按随机原则抽样分配,是最简单、最基本的抽样方法,不考虑样本之间的任何关系,完全随机的依次抽取样本,此法在药理学中较少应用;

2)均衡随机:首先将易于控制且对实验影响较大的因素作为分层指标,人为的使各组在这些指标上达到均衡一致,再按随机原则将个体分配在各组中,争取在年龄、性别、病情轻重等的构成比上基本一致。此法在药理学中常用。

例如动物实验随机化的方法有抽签法、甩尾法、随机数字表等。将n个受试对象编号,并按照肿瘤大小排序,平均分成5组,受试对象可按照甩尾的方式进行分组,每组6个样品,争取在随机原则情况下,指标可达到均衡的效果。

表格为甩尾法

今天小编介绍了很多种的随机化的方法,重点来了,各位看官们也可以使用葵花宝典--“SPSS软件”来进行最基本的简单随机抽样,这样取得精确可靠的实验结论势在必得。

3、重复原则(replication)

重复是指能在相同的条件下,要把实验结果重复出来,受试对象的样本数或实验次数要达到一定的数量,需在相同实验条件下进行多次研究或多次观察,最后的实验结果才能具有一定的可靠性。

1)除了重复数的数量问题外,还应重视重复数的质量问题,要采用精密、准确的实验方法,以减少实验误差。例如动物的品种、体重、年龄及性别;药物的浓度、剂量及质量;仪器的灵敏度、精确度及稳定性;此外还有室温、季节及气压的把控。

2)实验结论的重现性与可靠性同实验例数也相关,实验质量越高、误差越小、所需例数越小,但也不能少于“基本例数”。


实验设计的基本要素

目前药理学试验设计共有三大要素:处理因素、实验对象、实验效应,通过这些要素来确保研究项目的顺利完成。

1、实验中根据研究目的而定,由实验者人为施加给受试对象的因素称处理因素,如给病用药物、给病人实行某种手术等;

2、实验对象的选择非常重要,对实验结果有着极为重要的影响,通过药理学的实验学习新药研究的方法,如利用整体动物、病例模型动物、麻醉动物、生物体离体器官、组织、细胞、生物分子等实验培养等研究,在严格控制的条件下,观察各项指标。

3、实验效应-指标

指标分类及统计方法:计数指标(定性指标)、计量指标(定量指标)

实验设计的内容

实验设计的内容是验证实验真理的核心部分,其中的每一项都不可或缺,主要体现在几个方面,包括前期的目的及意义、材料及试剂的准备、实验对象的选择、实验方法需要谨慎操作,最后的数据处理及统计分析尤为关键。

药理学实验中,实验动物很重要哦,百奥赛图自产的模式小鼠非常优秀呢,大家感兴趣要记得联系我们啊,无时无刻不再等着您~

图片来源网络[3] 篇幅有限,今天的内容就到这里啦!后续会继续更新富有深意的文章,一定要多加留意小编的动态,敬请期待哈!

本文参考2010年5月由北京大学医学出版社出版的《药理学实验》。

 

参考资料

[1] http://www.sohu.com/a/271080392_464444

[2] http://www.doc88.com/p-6146486911140.html

[3] http://m.sohu.com/a/252206426_99925148/

[4] https://max.book118.com/html/2018/0808/5300131202001304.shtm

[5] 常福厚,韩瑞兰,杨玉梅. 药理学实验,北京大学医学出版社
 


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