汽化过氧化氢对含有蛲虫污染的动物笼具的消毒研究
实验室的啮齿动物经常被检测到有蛲虫感染（1）。将感染了蛲虫的实验动物用于科学实验，这不仅干扰影响了科学实验的结论正确性，降低科研的科学性、准确性及稳定性，而且还可能威胁研究人员的健康。
蛲虫发展有直接的生命周期，一般需要7~15天完成卵到成虫的变化。成虫主要在盲肠中发现。通过摄取雌虫在宿主肛门周边储存的卵子可以发现蛲虫感染的传播是水平性的，即主要通过粘膜传播。蛲虫卵在小肠内释放与孵化大约6小时之后，开始变得具有传染性。幼虫以内腔中的细菌为食，经过7~11天之后它们在盲肠中成熟。一只雌虫大约会释放450~550个卵（2）。这些卵具有顽强生命力，并很容易扩散，形成广泛的污染。它们在室温下可以存活很长时间，使用普通消毒剂很难消除（3）。
本文研究试图探讨过氧化氢蒸汽熏蒸法是否能成功杀灭污染了动物笼具的蛲虫卵。
动物与实验设计
实验分为3组进行，每组重复三次。每次有5只雄性、4周龄大的SCID小鼠。所有实验动物均为干净动物，无体内寄生虫。将它们暴露在被蛲虫污染过的鼠垫料笼子上，置于通风架，在无菌条件下饲养。在把实验动物放置这些脏笼子之前，这些脏笼子被以三种方式先进行处理：
1、 测试组：在30℃的室温下使用过氧化氢熏蒸15分钟；
2、 阴性对照组：在121℃的高温下，高压消毒20分钟；
3、 阳性对照组：无任何处理。
实验动物接触脏笼子两周后，将所有动物转移回干净的笼子。接着经过四周后，采取肛门胶纸粘试法测试；并再过两周后杀死所有动物，对它们进行直接的盲肠检查。
感染的检测
① 肛门胶纸粘试法：使用20*30mm的干净胶带条粘拭所有动物的肛门周围皮肤，然后贴在载玻片上，使用显微镜放大100倍检测卵子。
② 蛲虫直接检测法：解剖动物尸体，取盲肠内容物置于装有温生理盐水的培养皿中，再使用解剖显微镜进行10~20倍的放大倍数检查。
结果
①
Treatment Group
1st test
2nd test
3rd test
Total
soiled bedding fumigated
0/5
0/5
0/5
0/15
Soiled bedding autoclaved
0/5
0/5
0/5
0/15
Soiled bedding untreated
5/5
5/5
5/5
15/15
②
Treatment Group
1st test
2nd test
3rd test
Total
soiled bedding fumigated
0/5
0/5
0/5
0/15
Soiled bedding autoclaved
0/5
0/5
0/5
0/15
Soiled bedding untreated
5/5
5/5
5/5
15/15
1、 汽化过氧化氢熏蒸后的垫料组：重复三次均未发现实验鼠感染蛲虫；
2、 高温高压灭菌后的垫料组：重复三次均未发现实验鼠感染蛲虫；
3、 未经任何处理的垫料组：重复三次均发现实验鼠感染蛲虫。
讨论
研究背景与目的
对蛲虫感染的鼠繁殖群，未经环境消毒的情况下，用两种不同的伊维菌素治疗方案均未能消除鼠蛲虫。文献有争议性地讨论了环境消毒的必要性（2,5）。进一步说，关于对环境中啮齿动物蛲虫卵的生存以及它们对普通生理盐水的敏感性的研究数据非常有限（2）。本研究的目的是为了了解过氧化氢熏蒸法能否成功杀灭蛲虫卵，并结合抗菌治疗研究能否消除大鼠体内的寄生蛲虫。
研究设计
在初步实验中,成熟雌性虫子宫内的卵在经过15分钟的过氧化氢熏蒸后被完全破坏。然而，肛周胶纸粘试法显示成熟的卵没有这种被破坏效果，测试显示成熟卵未有明显的微观病变，可能是由于成熟卵的壳太厚并更有抵抗力。因此，研究决定用高度敏感的SCID小鼠作为生物测试模型进行体内感染实验检测。在一个成功的实验里，这些动物如果置放在未经处理的污染垫料上，应该都要被感染（阳性对照组）。经过过氧化氢熏蒸（测试组）或高温高压消毒（阴性测试组）的垫料上的所有老鼠应该保持干净状态。根据文献，感染了蛲虫的大鼠有一个短暂的潜伏期，约7~8天（6）。在本研究中，为了避免假阴性结果的发生，实验延长了揭露时间与观察时间（2周+6周），确保所有动物受感染有充足的时间范围。
方法细节
我们的实验使用了小型的高压舱进行熏蒸。由于舱体相对较小，灭菌过程相对加快。此外，更容易获得高浓度的过氧化氢接触。由于蛲虫卵对普通的消毒剂具有很强的抵抗力，我们选择了相对高浓度的过氧化氢。在杀菌阶段，总共注入了75g 30%浓度的过氧化氢溶液。这相当于每立方米有27.57g过氧化氢溶液或8.27g纯的过氧化氢。相对于之前用于动物房的消毒，这次的过氧化氢浓度约有两倍（7）。这些积极的结果使得可以开始大规模的实验测试。希望将来能有更详细的研究精确定义过氧化氢使蛲虫卵失活的剂量依赖性。
结论
本文的研究明确证明了使用过氧化氢熏蒸能完全使蛲虫卵对易受宿主失去感染力。本实验方法可推荐用于有效消除蛲虫污染的动物笼具，同时可用于热敏性设备的清洁比如通风架、鼓风机、净化工作台，以及其他电子设备（电脑、天平称、行为测试设备）。
参考文献：
(1)Jacoby,R.andJ.R.Lindsey(1988):ILARJ.39:266-271. (2)Pritchett,K.R.andN.A.Johnston(2002):Contemp.Top.Lab.Anim.41:36-46.
(3)Suckow.M.A.etal.(2001):The laboratory mouse.CRC Press,80-82.
(4)Krause,J.and H.Riedesel(2002):Lab.Anim.(submitted).
(5)Huerkamp.MJ.etal(2000):Contemp.Top.Lab.Anim.34:76-83.
(6)Lewis.J.W.andJ.D’Silva(1986):J.Helminthol.60:39-46.
(7)KrauseJ.etal(2001):Contemp.Top.Lab.Anim.40:18-21.
来源：倍尔科科技(深圳)有限公司
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标签： 蛲虫、蛲虫卵、过氧化氢
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