杂交瘤细胞免疫小鼠和脾细胞的制备介绍
免疫小鼠:取 6~8 周龄 Balb/C 雌鼠,基础免疫 2 周,静脉再加强免疫一次,3~5 天后用于融合。
脾细胞制备:
1.引颈处死小鼠,用酒精消毒表体。
2.无菌条件下取出脾脏,剃除结缔组织和脂肪,用 5ml 无血清培养液冲洗一次。
3.把脾脏置于已消毒的 90~100 目不锈钢网或尼龙纱网中。
4.在脾中部切开一小口,用注射器芯从一端轻轻压挤,再用无血清培养液冲洗,令细胞通 过纱网,收集入平皿中,或用注射器向脾脏内注入 3 ml 无血清培养液,反复抽吸数次方 法获取细胞,再制成细胞悬液亦可。
5.把细胞悬液注入 50ml 离心管中,加 10~20ml 培养液,轻轻吹打数次,室温中置 5 分钟。
6.离心(800~1000 转/分)计数,备用。
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