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ELISA实验中显色反响过程

2019.11.27

ELISA试剂盒实验中显色是ELISA试剂盒中的最后一步温育反响,此时酶催化无色的底物生成有色的产品。反响的温度和时刻仍是影响显色的因素。在一定时刻内,阴性孔可坚持无色,而阳性孔则随时刻的延伸而呈色加强。恰当提高温度有助于加速显色进行。在定量测定中,ELISA试剂盒参加底物后的反响温度和时刻应按规定力求。定性测定的显色可在室温进行,时刻一般不需要严格控制,有时可根据阳性对照孔和阴性对照孔的显色状况恰当缩短或,及时判断。

ELISA试剂盒约40分钟显色达顶峰,随即逐渐削弱,至2小时后即可完全衰退至无色。TMB的终止液有多种,叠氮钠和十二烷基硫酸钠(SDS)等酶抑制剂均可使反响终止。这类终止剂尚能使蓝色保持较长时刻(12-24小时)不褪,是目视判断的良好终止剂。此外,各类酸性终止液则会使蓝色转变成黄色,此时可用特定的波长(450nm)测读吸光值。


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