高纯度exosomes分离方法
外泌体（Exosomes）是一种直径在40～100 nm的圆形单层膜结构，可由机体众多类型细胞释放，并广泛分布于唾液、血浆、乳汁、尿液等体液当中。外泌体可携带多种蛋白质、mRNA、miRNA，参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。2007 年，Valadi等发现细胞分泌的外泌体中含有生物学活性的mRNA、microRNA，使得研究人员对外泌体的研究热情激增。
传统的外泌体分离要涉及超速离心，操作繁琐、过程冗长，所得到的外泌体纯度较低。美国101Bio提供的系列外泌体分离试剂盒，可从细胞培养基或血清中富集大量完整的外泌体，试剂盒具有
ü 方便——无需超速离心；
ü 快捷——不到2个小时即可完成外切体分离纯化；
ü 高回收率——是超速离心的5~10倍；
ü 高纯度——所得外切体纯度高达95% 以上；
ü 仅需2ml的细胞培养基或200ul血清，即可获得足够的外切体用于下游研究。
PureExo®Exosomes Isolation Kit for Cell Culture Media
试剂盒组分
Solution A、Solution B、Solution C和PureExo® Columns
操作步骤
1. 无血清培养或血清饥饿48小时的细胞培养液于4℃ 600 g 离心10mins取上清；
2. 在玻璃管中按照比例加入细胞上清液及ABC混合液摇匀；
3. 于4℃孵育1h后出现分层；
4. 弃上层培养基，并将其余液体转移至EP管；
5. 1000g离心3mins，出现分层，弃上层培养基及下层无色澄清液体；
6. 上述步骤重复操作一次；
7. 室温干燥5~10mins后用1X PBS重悬；
8. 重悬液转移至纯化柱中，2000g离心5mins；
9. 收集流出液即为外切体。
