破膜剂的秘密
用去污剂自制破膜剂，皂素、Tween-20、Triton-x哪个好？
我应该选择哪种方法破膜？
用哪种方法破膜，需根据你要标记的靶抗原和要求，例如如果你需要尽可能保持细胞形态和光散射特点，那么就需要选择对形态影响小的固定和破膜成份，并且要检测的靶分子位于胞浆还是胞核，也非常重要。
常用的破膜方法主要包括：
（1）有机溶剂：例如甲醇、丙酮等，这类溶剂主要通过溶解膜脂质、凝结膜蛋白实现固定和破膜。
（2）去污剂：这类试剂可在胞膜上形成一个孔实现破膜。
每种去污剂的作用原理是什么？
皂素：选择性与细胞膜胆固醇作用，将胆固醇从细胞膜上移除，从而形成孔洞。
Triton-X和Tween-20：非选择性，同时与蛋白质、脂质作用形成孔洞，并有可能将蛋白质、脂质从细胞膜上移除。
不同去污剂的优点和缺点
皂素：
（1）皂素的破膜是可逆的，所以皂素一旦被洗掉，容易致破膜效果降低甚至失效，所以后续的洗液中也需要包含皂素。
（2）不能破核膜。
（3）可保证膜表面抗原的完整性。
Triton-X-100 & Tween-20：
Triton-X和Tween-20之间的破膜性能差不多。
（1）非选择性，可能会导致蛋白和脂质丢失。
（2）可破所有脂质层。
（3）高浓度或长时间孵育可能导致细胞裂解。
（4）两者由于均含有苯环，故可吸收紫外光，所以如果你用紫外通道的荧光素，用这两种破膜剂可能会影响结果。
（5）如果你要检测的靶抗原是外源性凝集素类（Lectin），那么用Triton-X和Tween-20可能比皂素好。
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