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细菌的致病性与宿主非特异性免疫实验3

2019.4.08

巨噬细胞的吞噬作用

实验步骤	1. 试验前一天，给小鼠腹腔注射2%淀粉水溶液l ml，使巨噬细胞从腹膜血管渗到腹腔。 2. 制备2%鸡红细胞悬液l：取抗凝的鸡血2 ml加生理盐水8-l0 ml，混匀2000 rpm离心沉淀5 min，吸弃上清，同法再洗二次，末次2000 rpm离心沉淀10 min吸弃上清。吸压积的红细胞0.2 ml加入9.8ml生理盐水中，混匀后即为2%鸡红细胞悬液。 3. 24小时前注射淀粉的小鼠，腹腔注射2%鸡红细胞悬液1 ml。轻揉腹部，30 min后用颈椎脱臼法使小鼠死亡。死后立即剖开腹腔，用滴管吸出腹腔液滴在玻片上，每片约0.2 ml。 4. 把玻片放入37 ℃温箱中孵育30 min。 5. 取出玻片，用pH6.4的PBS轻轻冲洗玻片。巨噬细胞，中性粒细胞等吞噬细胞在孵育过程中已粘附在玻片上，轻轻冲洗不掉，其他非吞噬细胞则大部分被冲洗掉。 6. 用吹风机立即吹干，姬姆萨一瑞氏染色。 7. 结果：可见鸡红细胞被巨噬细胞吞噬。巨噬细胞及鸡红细胞的胞浆被染成淡红色，核为紫兰色。被吞噬的鸡红细胞尚未消化者，胞浆和核很清晰；刚开始消化的，胞浆色变浅，界限不清；消化后的胞浆消失，仅留下紫色的核或浅紫色的核轮廓。展开
注意事项	大小吞噬细胞的吞噬作用有何异同?

实验步骤

1. 试验前一天，给小鼠腹腔注射2%淀粉水溶液l ml，使巨噬细胞从腹膜血管渗到腹腔。

2. 制备2%鸡红细胞悬液l：取抗凝的鸡血2 ml加生理盐水8-l0 ml，混匀2000 rpm离心沉淀5 min，吸弃上清，同法再洗二次，末次2000 rpm离心沉淀10 min吸弃上清。吸压积的红细胞0.2 ml加入9.8ml生理盐水中，混匀后即为2%鸡红细胞悬液。

3. 24小时前注射淀粉的小鼠，腹腔注射2%鸡红细胞悬液1 ml。轻揉腹部，30 min后用颈椎脱臼法使小鼠死亡。死后立即剖开腹腔，用滴管吸出腹腔液滴在玻片上，每片约0.2 ml。

4. 把玻片放入37 ℃温箱中孵育30 min。

5. 取出玻片，用pH6.4的PBS轻轻冲洗玻片。巨噬细胞，中性粒细胞等吞噬细胞在孵育过程中已粘附在玻片上，轻轻冲洗不掉，其他非吞噬细胞则大部分被冲洗掉。

6. 用吹风机立即吹干，姬姆萨一瑞氏染色。

7. 结果：可见鸡红细胞被巨噬细胞吞噬。巨噬细胞及鸡红细胞的胞浆被染成淡红色，核为紫兰色。被吞噬的鸡红细胞尚未消化者，胞浆和核很清晰；刚开始消化的，胞浆色变浅，界限不清；消化后的胞浆消失，仅留下紫色的核或浅紫色的核轮廓。

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注意事项

大小吞噬细胞的吞噬作用有何异同?

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