分析测试百科网 > 行业资讯 > 技术原理

用棉花幼苗外植体法测定脱落酸的活性实验

2019.4.11

实验方法原理	脱落酸能增强果胶酶和纤维素酶的活性，引起离层产生，导致脱落。在一定浓度范围内，脱落率与脱落酸浓度成正比，脱落时间与脱落酸浓度成反比。
实验材料	棉花幼苗
试剂、试剂盒	脱落酸溶液
仪器、耗材	手术剪刀单面刀片烧杯镊子培养皿注射器石英砂蛭石脱脂棉琼脂
实验步骤	一、材料与设备棉花幼苗手术剪刀或单面刀片，烧杯，镊子，直径10cm 培养皿，100 M M 3注射器，石英砂或蛭石，脱脂棉，琼脂药品 100pp M 脱落酸溶液：20 M g（±）－脱落酸用少量乙醇溶解，用蒸馏水定容至100 ml 。 1.5％琼脂培养基：1.5份琼脂和100份蒸馏水（w/w）放入烧杯中加热。待琼脂完全溶解后，趁热倒入培养皿中，使琼脂胶厚度达5 MM 左右。二、实验步骤 1．挑选经硫酸脱绒的饱满棉种，在28－30℃下浸 24小时，然后播在湿润的石英砂中，于25℃恒温箱中照光培养，直至长出第一片真叶。培养期间应经常浇水，以保持石英砂湿润。 2．从幼苗上取下外植体。外植体是由5 M M 真叶叶柄，5 M M 子叶叶柄和10 M M 下胚轴组成。在每一切面上包少许脱脂棉。然后将下胚轴插于琼脂胶中。每皿插10个外植体。 3．配制0.05，0.5，5，10，20pp M 的脱落酸溶液。 4．将插有棉花外植体的培养皿分成六组，编号，每组用一种浓度的脱落酸处理。处理方法是用微量注射器在各叶柄的切面上加50 M M 3脱落酸溶液。 5．处理24小时后，用镊子轻碰叶柄，看是否脱落。以后每天早晚用镊子检查一次。比较同一时间各处理的脱落率和各处理脱落率达80%所需的时间。三、结果展开