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放线菌形态观察实验——印片法

2019.4.08
实验方法原理

将要观察的放线菌的菌落或菌苔,先印在载玻片上,经染色后观察。这种方法主要用于观察孢子丝的形态、孢子的排列及其形状等。方法简便、但形态特征可能有所改变。

实验材料

细黄链霉菌/青色链霉菌/弗氏链霉菌

试剂、试剂盒

石炭酸复红染液

仪器、耗材

灭菌的高氏1号琼脂平皿盖玻片载玻片接种环接种铲/解剖刀镊子显微镜

实验步骤

1. 接种培养

用高氏 1 号琼脂平板,常规划线接种或点种。28 ℃ 培养 4~7 d。也可用扦片法和玻璃纸法所使用的琼脂平板上的培养物,作为制片观察的材料。


2. 印片

用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基切下一小块,菌面朝上放在一载玻片上。另取一洁净载玻片置火焰上散热后,盖在菌苔上,轻轻按压,使培养物(气丝、孢子丝或孢子)粘附(「印」)在后一块载玻片的中央,有印迹的一面朝上,通过火焰 2~3 次固定。


3. 染色

用石炭酸复红覆盖印迹,染色约 1 min 后水洗。


4. 镜检

干后用油镜观察。

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注意事项

印片时不要用力过大压碎琼脂,也不要错动,以免改变放线菌的自然形态。


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