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疟原虫形态学观察实验

2020.8.24

实验方法原理	人体疟原虫有四种，即间日疟原虫（P．vivax），三日疟原虫（P. malariae），恶性疟原虫（P. falciparum）及卵形疟原虫（P. ovale）。间日疟原虫及恶性疟原虫较多见，三日疟原虫及卵形疟原虫较少见和罕见。疟原虫需要两个宿主才能完成其生活史，在人体内进行裂体增殖，包括红细胞外期、红细胞内期，在蚊体内进行配子生殖和孢子生殖。一、间日疟原虫薄血膜染色标本 (Thin Blood Smears of Plasmodium vivax ) 间日疟患者血涂片，瑞一姬氏染色，镜下观察。先在低倍镜下确定血膜平面，血涂片薄而均匀或红细胞呈单层均匀排列的部位（通常为血片近末端），加油后，转油镜观察。在红细胞内找疟原虫，经瑞一姬氏染色后，疟原虫的细胞质染成蓝色，细胞核染成红色、疟色素(malarial　pigment)为黄褐色。注意与血片中的其他细胞、染料渣等区别。 1．环状体（Ring form）此期被寄生的红细胞尚无改变。疟原虫的细胞质呈环状，红色的核为点状，在环的一边，很象一个宝石戒指。环状体的大小约占红细胞直径的l/3~l/4左右。 2．大滋养体（Large trophozoite）环状体进一步发育的形态，此时被寄生的红细胞胀大，色较淡，红细胞上常有许多红色小点即薛氏小点（Schuffner’s dots）。原虫的细胞质增多有伪足伸出。红色的核也显著增大，细胞质上有黄褐色的疟色素颗粒。 3．裂殖体(Schizont) 有未成熟与成熟两种形态。此时细胞质较致密，伪足已消失，核先分裂，然后细胞质分裂，未成熟裂殖体(unmature schizont)的核尚未分裂到一定数目，细胞质尚未分开。成熟裂殖体(mature schizont)的核已分裂到一定数目即12~24个（平均16个），细胞质围绕每一个细胞核形成裂殖子。此时黄褐色的疟色素颗粒集中在虫体中央或一侧。 4．配子体(gametocyte) 经过3～5代裂体增殖后，有一部分裂殖子侵入红细胞后发育为配子体。此时被寄生的红细胞胀大。雌雄配子体均呈圆形，疟色素颗粒则均匀地分布在细胞质中。雌配子体(macrogametocyte)的核与细胞质均较致密，染色后细胞质为兰色，核为红色偏于一边,即为核小、致密、在一边。雄配子体(microgametocyte)核与细胞质较疏松，核较大，位近中央，即为核大、疏松、在中央。图一、Fig. 1:正常红细胞 Normal red cell; Figs. 2-6:小滋养体 Young trophozoites (ring stage parasites);Figs. 7-18: 大滋养体Trophozoites;Figs. 19-27: 裂殖体Schizonts;（19-22 unmature schizont;23-27 mature schizont） Figs.28 and 29:雌配子体 Macrogametocytes (female);Fig. 30: 雄配子体 Microgametocyte (male). 二恶性疟原虫薄血膜染色标本(Thin Blood Smears of Plasmodium falciparum) 观察方法与间日疟原虫标本相同。环状体较间日疟的小，占红细胞的1／6左右。环小，常在一个环上有一个细胞核，有的环状体贴于红细胞边缘，尤如飞鸟状。一个红细胞内常可见二个或更多的恶性疟原虫环状体。恶性疟原虫的大滋养体与裂殖体在周围血液中一般不易查见。配子体所寄生的红细胞常被胀破而不见。雌配子体呈新月形，两端较尖。雄配子体呈腊肠形，两端较圆。细胞核都在虫体中央，核的周围有疟色素颗粒。图二、 1: 正常红细胞Normal red cell;Figs. 2-18:滋养体Trophozoites (among these, Figs. 2-10 correspond to ring-stage trophozoites); Figs. 19-26: 裂殖体Schizonts (Fig. 26 is a ruptured schizont); Figs. 27, 28:雌配子体 macrogametocytes (female); Figs. 29, 30: 雄配子体 microgametocytes (male).

实验方法原理

人体疟原虫有四种，即间日疟原虫（P．vivax），三日疟原虫（P. malariae），恶性疟原虫（P. falciparum）及卵形疟原虫（P. ovale）。间日疟原虫及恶性疟原虫较多见，三日疟原虫及卵形疟原虫较少见和罕见。疟原虫需要两个宿主才能完成其生活史，在人体内进行裂体增殖，包括红细胞外期、红细胞内期，在蚊体内进行配子生殖和孢子生殖。

一、间日疟原虫薄血膜染色标本 (Thin Blood Smears of Plasmodium vivax )

间日疟患者血涂片，瑞一姬氏染色，镜下观察。先在低倍镜下确定血膜平面，血涂片薄而均匀或红细胞呈单层均匀排列的部位（通常为血片近末端），加油后，转油镜观察。在红细胞内找疟原虫，经瑞一姬氏染色后，疟原虫的细胞质染成蓝色，细胞核染成红色、疟色素(malarial　pigment)为黄褐色。注意与血片中的其他细胞、染料渣等区别。

1．环状体（Ring form）此期被寄生的红细胞尚无改变。疟原虫的细胞质呈环状，红色的核为点状，在环的一边，很象一个宝石戒指。环状体的大小约占红细胞直径的l/3~l/4左右。

2．大滋养体（Large trophozoite）环状体进一步发育的形态，此时被寄生的红细胞胀大，色较淡，红细胞上常有许多红色小点即薛氏小点（Schuffner’s dots）。原虫的细胞质增多有伪足伸出。红色的核也显著增大，细胞质上有黄褐色的疟色素颗粒。

3．裂殖体(Schizont) 有未成熟与成熟两种形态。此时细胞质较致密，伪足已消失，核先分裂，然后细胞质分裂，未成熟裂殖体(unmature schizont)的核尚未分裂到一定数目，细胞质尚未分开。成熟裂殖体(mature schizont)的核已分裂到一定数目即12~24个（平均16个），细胞质围绕每一个细胞核形成裂殖子。此时黄褐色的疟色素颗粒集中在虫体中央或一侧。

4．配子体(gametocyte) 经过3～5代裂体增殖后，有一部分裂殖子侵入红细胞后发育为配子体。此时被寄生的红细胞胀大。雌雄配子体均呈圆形，疟色素颗粒则均匀地分布在细胞质中。雌配子体(macrogametocyte)的核与细胞质均较致密，染色后细胞质为兰色，核为红色偏于一边,即为核小、致密、在一边。雄配子体(microgametocyte)核与细胞质较疏松，核较大，位近中央，即为核大、疏松、在中央。

图一、Fig. 1:正常红细胞 Normal red cell; Figs. 2-6:小滋养体 Young trophozoites (ring stage parasites);Figs. 7-18: 大滋养体Trophozoites;Figs. 19-27: 裂殖体Schizonts;（19-22 unmature schizont;23-27 mature schizont） Figs.28 and 29:雌配子体 Macrogametocytes (female);Fig. 30: 雄配子体 Microgametocyte (male).

二恶性疟原虫薄血膜染色标本(Thin Blood Smears of Plasmodium falciparum)

观察方法与间日疟原虫标本相同。环状体较间日疟的小，占红细胞的1／6左右。环小，常在一个环上有一个细胞核，有的环状体贴于红细胞边缘，尤如飞鸟状。一个红细胞内常可见二个或更多的恶性疟原虫环状体。恶性疟原虫的大滋养体与裂殖体在周围血液中一般不易查见。配子体所寄生的红细胞常被胀破而不见。雌配子体呈新月形，两端较尖。雄配子体呈腊肠形，两端较圆。细胞核都在虫体中央，核的周围有疟色素颗粒。

图二、 1: 正常红细胞Normal red cell;Figs. 2-18:滋养体Trophozoites (among these, Figs. 2-10 correspond to ring-stage trophozoites); Figs. 19-26: 裂殖体Schizonts (Fig. 26 is a ruptured schizont); Figs. 27, 28:雌配子体 macrogametocytes (female); Figs. 29, 30: 雄配子体 microgametocytes (male).

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