最全面的质谱定性与定量分析方法基础知识讲解（二）
2.外标曲线法
☞以纯溶剂配制标准工作溶液
GB/T22260-2008饲料中甲基睾丸酮的测定高效液相色谱串联质谱法
GB/T22955-2008河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中苯并咪唑类药物残留量的测定：液相色谱-串联质谱法
GB/T21324-2007食用动物肌肉和肝脏中苯并咪唑类药物残留量检测方法
☞以空白样品提取液配制标准工作溶液
GB/T23409-2009蜂王浆中土霉素、四环素、金霉素、强力霉素残留量的测定：液相色谱-质谱/质谱法;
GB/T23408-2009蜂蜜中大环内酯类药物残留量测定液相色谱-质谱/质谱法;
GB/T22986-2008牛奶和奶粉中氢化泼尼松残留量的测定液相色谱-串联质谱法;
GB/T22978-2008牛奶和奶粉中地塞米松残留量的测定液相色谱-串联质谱法;
☞空白样品加入系列浓度的标准工作液，提取后得到系列基质标准工作液
GB/T21312-2007动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法：液相色谱-质谱/质谱法
GB/T22969-2008奶粉和牛奶中链霉素、双氢链霉素和卡那霉素残留量的测定液相色谱-串联质谱法
GB/T 水果、蔬菜中啶虫脒残留量的测定液相色谱-串联质谱法
GB/T21313-2007动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法液相色谱-质谱/质谱法
(二)内标法
1.内标物
基本要求：
(a)试样中不含有该物质;
(b)与被测组分性质比较接近;
(c)不与试样发生化学反应;
(d)出峰位置应位于被测组分附近。
2.计算式
3.特点
4.内标标准曲线定量方法
配制系列标准溶液，分别加入等量的内标物,混合后进行色谱分析。以待测组分的浓度为横坐标，待测组分与内标物峰面积(或峰高)的比率为纵坐标建立标准曲线(或线性方程)。
在分析未知样品时，分别加入与绘制标准曲线时等量的内标物，用样品与内标物峰面积(或峰高)的比值，在标准曲线上查出被测组分的浓度或用线形方程计算。
5.应用实例及相关标准
☞以纯溶剂配制系列标准工作溶液
GB/T23406-2009 肠衣中硝基咪唑类药物及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法;
GB/T23407-2009 蜂王浆中硝基咪唑类药物及其代谢物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法;
GB/T23411-2009蜂王浆中17种喹诺酮类药物残留量的测定液相色谱-质谱/质谱法;
GB/T23412-2009蜂蜜中19种喹诺酮类药物残留量的测定方法液相色谱-质谱/质谱法;
☞以空白样品的提取液配制系列标准工作溶液
GB/T22992-2008牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定液相色谱-串联质谱法;
GB/T22959-2008河豚鱼、鳗鱼和烤鳗中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定 液相色谱-串联质谱法;
GB/T20756-2006可食动物肌肉、肝脏和水产品中氯霉素、甲砜霉素和氟苯尼考残留量的测定液相色谱-串联质谱法;
☞空白样品加入系列浓度的标准工作液，提取后得到基质标准工作液
GB/T21311-2007动物源性食品中硝基呋喃类药物代谢物残留量检测方法高效液相色谱 串联质谱法
GB/T21310-2007动物源性食品中甲状腺拮抗剂残留量检测方法高效液相色谱-串联质谱法
(三)标准加入法
♪先测定出未知样品的大概值，然后根据这个测定值去设定标准加入法
♪标准加入法中第一点加入标准溶液为“0”，第二点加入的量约与待测组分的含量大致相等，共3～5个点，以加入的标准溶液的浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制工作曲线
♪工作曲线在横坐标延长线上的交点到坐标原点的距离即为样品中待测组分的浓度
♪标准加入法可以看作是内标法和外标法的结合
♪由于待测组分以及加入的标准溶液处在相同的样品基体中，因此，这种方法可以消除基质干扰
♪但是，由于对每一个样品都要配制三个以上的、含样品溶液和标准溶液的混合溶液，因此，这种方法不适于大批样品的分析
☞前提
具有线性关系，并且标准曲线通过坐标原点;尽可能减小系统误差;试样的基质效应不得随被测组分含量对干扰组分含量比值改变而改变必须扣除背景和空白值。
(四)基质效应
1.概念
基质效应是指在样品测试过程中，由于待测物以外的其他物质的存在，直接或间接影响待测物响应的现象。
由于质谱检测的高选择性，基质效应的影响在色谱图上往往观察不到，即空白基质色谱图表现为一条直线，但这些共流出组分会改变待测物的离子化效率，引起对待测物检测信号的抑制或提高。
2.产生机制
3.来源
内源性：来源于待测样品，如，蛋白、脂质、多糖、目标组分的类似物，其他色谱共流出物;
外源性：流动相组成、样品处理过程中带入、管路、环境。
4.评价
(1)提取后加入法
是一种静态的方法，只能提供基质效应在待测成分出峰位置点上的影响信息，但能以具体的数据体现基质效应对待测成分响应的影响程度;
(2)灌后加入法
(五)消除
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