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犬类病原体的检测方法

2020.4.21

首先,小编来给大家科普一下,犬类常见的疾病及诊断方式。犬类所有疾病中,犬瘟热病毒、狂犬病毒、犬细小病毒、犬冠状病毒、犬疱疹病毒占据犬类病原体疾病50%以上。目前市面上用的最多的是胶体金免疫试纸条法,通过检测抗原或抗体来诊断疾病,操作简单,5-10min内可以观察结果。但是试纸条检测有一定缺陷存在,容易出现假阴性和假阳性。发病初期,抗体水平尚未达到检测限,易出现假阴性;病情痊愈后,抗体依旧存在,检测结果出现假阳性。另外,检测结果为弱阳性时,表明可能会发病或者不发病,不能得到有效诊断,因此,该方法也遭到许多质疑。通过走访宠物医院我们发现,宠物医生普遍反应试纸条检测准确率太低,许多经经验判断或其他检测送检确诊的病例用试纸条检测,结果仍然为阴性,成为困扰宠物医生的头号问题。

近年来,直接检测病原体基因的分子诊断方法兴起,聚合酶链式反应(PCR)用于分子检测也逐渐占据疾病诊断市场,PCR检测结果灵敏度和特异性都高于试纸条,但是相对操作复杂,需要样品前处理、核酸提取、核酸扩增、检测等步骤,且需配备操作复杂的扩增仪和检测仪,需要专业的分子操作人员,无形中增加了检测难度和成本,不适合于一般的宠物医院使用。

新研发出新一代核酸分子检测技术-SEA,SEA产品直接对病原体基因检测,准确度和PCR相似,但是操作更为简单,可以在20min分钟左右通过肉眼比色或荧光即可判别结果,是一款介于PCR和试纸条之间的产品。

应用SEA技术产品检测样本可分为三步:

1)核酸裂解:将样本加入裂解液中,热裂解;

2)核酸扩增:在管中加入buffer A、buffer B 、buffer C和模板,上机扩增。

3)结果判读:通过颜色判读结果或机器直接打印报告。

同时本产品具有以下明显优势,优于市面产品:

1)多种靶标:国际首创的DNA/RNA一步法,检测结果更为准确;

2)等温检测:检测过程温度恒定,体系稳定;

3)成本更低:反应体系简单,无需复杂的仪器,成本有效降低50%以上。


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