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重组腺病毒转染细胞前为什么要用pacI酶切线性化

2022.3.09

包装前需要将腺病毒质粒用PacI酶切线性化与腺病毒的基因组结果及腺病毒的复制机制有关。
腺病毒质粒是双链环状DNA,而腺病毒的基因组DNA是双链线性DNA。
腺病毒基因组复制的时,先解链暴露出两个反向末端重复序列,然后这两个反向末端重复序列退火,形成锅柄结构,腺病毒基因组的复制是从锅柄的位置开始的。
包装前用PacI酶切的目的在于暴露出腺病毒基因组两侧的反向末端重复序列。
http://www.dxy.cn/bbs/topic/9261660?onlyHost=1&ppg=2

用PmeI酶切线性化(不完全消化往往产生较高的背景,从而降低重组率)。
http://www.docin.com/p-81111142.html

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