生物素-链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用（一）
生物素-链霉亲和素结合系统的广泛采用主要是由于两个因素。第一个是生物素和链霉亲和素分子本身相对较小，它可以与生物活性大分子（例如抗体）广泛结合，而不会对其功能（即抗体的结合位点）产生抗性。第二个是生物素和链霉亲和素彼此结合的特异性，以及后续键的强度，可实现强大的流线型生物测定应用。链霉亲和素四聚体对生物素具有极高的结合亲和力，解离常数（K d）约为10 -14摩尔/升。这种紧密而特异性的结合是快速的，并且能够承受pH，温度，有机溶剂和变性剂的极端作用。
图1.链霉亲和素-生物素相互作用的图示。链霉亲和素的多价特性使其能够以高度亲和力结合多达四个生物素分子。生物素通常与酶，抗体或靶蛋白缀合。
生物素-链霉亲和素系统的优点
生物素-链霉亲和素系统的主要优势在于其提高检测灵敏度的能力。这在很大程度上是由于链霉亲和素的四聚体构象。一种链霉亲和素蛋白具有以高亲和力和选择性结合四个生物素分子的能力。这种多样性使得能够放大微弱的信号，并以简单的工作流程提高了对哺乳动物细胞或组织中中等和低丰度靶标的检测灵敏度。
另一个关键优势是生物素-链霉亲和素系统的多功能性。由于链霉亲和素可以与多种报道分子标记物偶联，因此几乎可以将其掺入每个免疫测定中。例如，链霉亲和素的酶结合物被用于酶联免疫吸附测定（ELISA）中，而荧光标记的链霉亲和素，例如iFluor™488链霉亲和素，被广泛用于细胞表面标记，荧光激活细胞分选（FACS）和其他荧光成像应用。
应用领域
酶联免疫吸附测定（ELISA）
免疫组织化学（IHC）
Power Styramide™信号放大，可替代酪胺
免疫印迹
免疫荧光显微镜
细胞表面标记
亲和纯化
荧光激活细胞分选（FACS）
流式细胞仪
生物素
生物素是一个244道尔顿的半抗原小分子，由于它对链霉亲和素的异常强的结合亲和力通常被用来检测和监测目标生物学靶标。生物素具有两个特性，使其非常适合于生物缀合物的开发。 首先，生物素的体积相对较小。这允许将多个生物素标签标记为单个蛋白质或抗体，而不会显着阻碍其生物反应性。其次，是生物素分子的戊酸侧链。该链可被衍生化，以促进用于化学标记生物素的各种反应基团结合到蛋白质上，而不会改变生物素对链霉亲和素的结合亲和力。
特色产品
荧光生物素衍生物
生物素化二抗
生物素化核苷酸
生物素化氨基酸
活性生物素衍生物
ReadiLink™蛋白质生物素化试剂盒
Amplite™比色生物素定量试剂盒
1. 荧光生物素衍生物
荧光生物素衍生物在同一分子中同时包含荧光团和生物素部分。这些试剂用于通过荧光检测和定量生物素结合蛋白。与链霉亲和素与荧光生物素结合相关的强烈淬灭可用于精确测量链霉亲和素（或抗生物素蛋白）的浓度。
表1.荧光生物素衍生物
| 产品名称 | Ex/Em (nm) | Ext. Coeff.¹ | FQY² | 规格 | 货号 |
| Biotin-4-fluorescein *CAS 1032732-74-3* | 492/518 | 80,000 | 0.7900 | 5 mg | 3006 |
| Fluorescein biotin | 497/516 | 80,000 | 0.7900 | 5 mg | 3017 |
| Cy5 biotin conjugate | 650/669 | 250,000 | 0.27 | 5 mg | 3100 |
