生物素-链霉亲和素结合系统及衍生品的实际应用（二）
注意：
Ext. Coeff. = 在其最大吸收波长处的摩尔消光系数（单位= cm -1 M -1）。
FQY = 在水性缓冲液（pH 7.2）中的荧光量子产率。
2.生物素化二抗
我们提供生物素化的二抗，可与基于链霉亲和素的扩增技术一起使用。使用生物素化的二抗的主要优势在于，只需简单地使用不同的链霉亲和素偶联物，即可在各种应用中灵活使用相同的生物素化二抗。
图2 HeLa细胞中α-微管蛋白的免疫荧光染色
表2.生物素化二级抗体的可用产品
| 产品名称 | 宿主/亚型 | 物种反应性 | 规格 | 货号 |
| 生物素化山羊抗小鼠IgG（H + L） | 山羊/ IgG | 老鼠 | 1 mg | 16729 |
| 生物素化山羊抗兔IgG（H + L） | 山羊/ IgG | 兔子 | 1 mg | 16794 |
3. 生物素化核苷酸
可以将生物素修饰的三磷酸核苷类似物（例如dUTP和dCTP）通过酶法掺入DNA或RNA片段中，以用于荧光原位杂交（FISH），DNA阵列，微阵列和其他杂交技术。标准的酶促非放射性DNA标记反应包括3'-末端标记，cDNA标记，Nick翻译，PCR和随机引物标记。每个生物素化的核苷酸在生物素及其在核苷酸上的连接点之间包含11、14、16或20原子的间隔区间。这有助于通过荧光团和酶标记的链霉亲和素结合物或琼脂糖磁珠进行检测和信号放大。
表3. 生物素化核苷酸
| 产品名称 | 连接物长度 | 规格 | 货号 |
| 生物素-11-dUTP | 11个碳 | 25 nmoles | 17016 |
| 生物素16-dUTP | 16个碳 | 25 nmoles | 17017 |
| 生物素20-dUTP | 20个碳 | 25 nmoles | 17018 |
| 生物素-14-dCTP | 14个碳 | 25 nmoles | 17019 |
4. 生物素化氨基酸
生物素化的肽适用于需要固定在链霉亲和素或抗生物素蛋白包被的微量滴定板，珠子或膜上的免疫检测研究和生物医学筛选分析。在Fmoc固相合成过程中，生物素可与肽段的N末端或赖氨酸（Lys），谷氨酸（Glu）或天冬氨酸（Asp）的侧链相连。FMOC-Glu（生物素-PEG）-OH和FMOC-Asp（生物素-PEG）-OH中的PEG-间隔物的比例降低，可降低目标肽和链霉亲和素之间的空间位阻，从而获得更好的生物素结合。PEG-间隔基的亲水性质使非特异性作用最小化，并提高了试剂和生物素化肽的溶解度。
表4. 生物素化氨基酸
| 产品名称 | 标签原理 | 衍生物 | 规格 | 货号 |
| FMOC-赖氨酸（生物素）-OH | 使用FMOC-SPPS制备生物素标记的肽 | 赖氨酸 | 100 mg | 5020 |
| FMOC-Glu（生物素-PEG）-OH | 使用FMOC-SPPS制备生物素标记的肽 | 谷氨酸 | 100 mg | 5026 |
| FMOC-Glu（生物素-PEG）-OH | 使用FMOC-SPPS制备生物素标记的肽 | 谷氨酸 | 1 g | 5027 |
| FMOC-Asp（生物素-PEG）-OH | 使用FMOC-SPPS制备生物素标记的肽 | 天冬氨酸 | 100 mg | 5023 |
| FMOC-Asp（生物素-PEG）-OH | 使用FMOC-SPPS制备生物素标记的肽 | 天冬氨酸 | 1 g | 5024 |
5. 反应性生物素衍生物
反应性生物素衍生物包含反应性基团，例如琥珀酰亚胺酯或马来酰亚胺，它们有助于将生物素标记到蛋白质，抗体和其他大分子上。选择反应性生物素衍生物时，请注意以下事项：
官能团靶向 -特定的反应性部分靶向并结合到它们各自的官能团上，以进行蛋白质和其他大分子的靶向或非选择性生物素化（例如琥珀酰亚胺酯靶向伯胺，马来酰亚胺靶向巯基或巯基）。
溶解度 -这会影响目标蛋白质或大分子的生物素化。
间隔臂长度（PEG） -提高目标蛋白的检测灵敏度并减少空间位阻
表5. 反应性生物素化试剂
| 产品名称 | 靶向官能团 | 反应基团 | 规格 | 货号 |
| 生物素X琥珀酰亚胺酯* CAS 72040-63-2 * | 胺 | 琥珀酰亚胺酯 | 25 mg | 3010 |
| 生物素琥珀酰亚胺酯* CAS 35013-72-0 * | 胺 | 琥珀酰亚胺酯 | 100 mg | 3002 |
| 生物素PEG4琥珀酰亚胺酯 | 胺 | 琥珀酰亚胺酯 | 25 mg | 3022 |
| 生物素-PEG3-叠氮化物* CAS 945633-30-7 * | 炔烃 | 叠氮化物 | 5 mg | 3019 |
| 生物素PEG3胺 | 醛，羧酸，酮 | 胺 | 5 mg | 3024 |
| 生物素PEG2琥珀酰亚胺酯 | 胺 | 琥珀酰亚胺酯 | 25 mg | 3016 |
| 生物素PEG2马来酰亚胺* CAS 305372-39-8 * | 硫醇 | 马来酰亚胺 | 5 mg | 3015 |
| 生物素PEG2胺* CAS 138529-46-1 * | 醛，羧酸，酮 | 胺 | 5 mg | 3014 |
| 生物素酰肼* CAS 66640-86-6 * | 醛，羧酸，酮 | 酰肼 | 5 mg | 3007 |
| 生物素乙二胺* CAS 216299-38-6 * | 醛，羧酸，酮 | 乙二胺 | 5 mg | 3003 |
6. ReadiView™生物素化试剂
想要确定蛋白质的生物素化程度非常具有挑战性，因为很难从蛋白质和核酸中分辨出生物素的内在吸收。为便于确定，我们提供了一系列能进行显色反应的Boitin衍生物ReadiView™生物素。这些新型的生物素化试剂包含经过特殊设计的“颜色标签（CT）”，该标签最佳地位于两个间隔臂之间。这些间隔臂可减少空间位阻并改善水溶性，而CT标签可通过计算280 nm / 385 nm的吸收率来量化生物素化程度。CT标签不影响生物素与链霉亲和素的结合，对荧光链霉亲和素结合物的猝灭作用极小。ReadiView™生物素具有胺反应性，硫醇反应性和点击化学(Click chemistry)形式。
图3. 与专门设计的颜色标签（Color Target）结合的ReadiView™生物素琥珀酰亚胺酯（货号：3059），使其易于确定样本生物素化程度。
表6. ReadiView™生物素产品
| 产品名称 | 靶向官能团 | Spacer | 规格 | 货号 |
| ReadiView™生物素琥珀酰亚胺酯 | 胺类 | 聚乙二醇化 | 5毫克 | 3059 |
| ReadiView™生物素马来酰亚胺 | 巯基或巯基 | 聚乙二醇化 | 5毫克 | 3058 |
| ReadiView™生物素酰肼 | 醛，羧酸，酮 | 聚乙二醇化 | 5毫克 | 3055 |
| ReadiView™生物素胺 | 羰 | 聚乙二醇化 | 5毫克 | 3053 |
| ReadiView™生物素酸 | 胺 | 聚乙二醇化 | 5毫克 | 3050 |
