玻璃酸酶的检查方法
酸碱度取本品适量,加水溶解并稀释制成每1ml中含3mg的溶液,依法测定(通则0631),pH值应为溶液的澄清度与颜色取本品0.10g,加水10ml溶解后,依法检查(通则0901第一法与通则0902第一法),溶液应澄清无色;如显色,与黄色4号标准比色液比较,不得更深吸光度取本品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中含300单位的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,在280nm波长处的吸光度不得大于0.60;在260nm的波长处的吸光度不得大于0.42酪氨酸照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml约含5mg的溶液酪氨酸对照品溶液取酪氨酸对照品适量,精密称定,加0.2mol/L硫酸溶液溶解并定量稀释制成每1ml中约含30μg的溶液。测定法取甲、乙两支离心管,甲管中加供试品溶液1ml,乙管中加水1ml,分别在105℃蒸发至干,各加6mol/L氢氧化钠溶液0.2ml,以121℃饱和蒸汽加热3小时或于水浴中加热4~5小时,取出放冷,各加3.5mol/L硫酸溶液0.3ml,甲管中加水1.5ml,乙管中加酪氨酸对照品溶液1.5ml,然后各加含15%硫酸汞的2.5mol/L硫酸溶液1.5ml,置水浴中加热10分钟,放冷,加3.5mol/L硫酸溶液1ml与0.2%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀,立即加水至6ml,计时,摇匀,离心。20分钟后,吸取上清液,在540nm的波长处分别测定吸光度,按下式计算。酪氨酸含量(μg/单位)=Wr(mg)×每1mg含有的玻璃酸酶活力单位式中Ar为供试品溶液的吸光度;As为酪氨酸对照品溶液的吸光度;Wr为本品的取样量,mgC为对照品溶液浓度,gg/ml限度每1单位玻璃酸酶中含酪氨酸不得过0.1pg。干燥失重取本品约0.50g,以五氧化二磷为干燥剂,在60℃减压干燥2小时,减失重量不得过5.0%(通则异常毒性取体重17~22g的健康小鼠5只,分别由皮下注射每1m1中含玻璃酸酶10000单位的氯化钠注射液0.25ml,48小时内不得发生皮下组织坏死或死亡现象,如有只小鼠发生组织坏死或死亡,应按上述方法复试,全部小鼠在48小时内不得有组织坏死或死亡现象。细菌内毒素取本品,依法检查(通则1143),每1单位玻璃酸酶中含内毒素的量应小于0.20EU
