多肽荧光标记——FITC修饰和AMC修饰(二)
(2)在整条肽中的某个Lys侧链接入FITC,Lys侧链为末端为-NH2的四碳直链烷基,直接起到了降低空间位阻的作用。这种修饰方式能够灵活的在整条肽中任何位置进行FITC修饰,而不仅仅局限于末端。
我们所采用的FITC修饰多肽的两种形式,都具有操作简便,成功率高,容易分离纯化等优点。
2.AMC修饰
7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)是一种应用广泛的荧光标记试剂,例如,酶的痕量测定,酶的鉴定,激光染料的制备等多种用途,此外,C端用香豆素修饰的泛素分子也是研究蛋白质泛素化过程的重要探针。
与其他荧光染料不同的是,AMC修饰多肽分子是从C端进行:(1)AMC与肽链C端第一个氨基酸反应;(2)固相合成整条肽链(从第二个氨基酸开始),并且保留整条肽链的侧链保护基和最后一个氨基保护基;(3)液相缩合AA-AMC与全保护的肽链;(4)切除保护基,完成肽链的修饰。
国肽生物提供5(6)-FAM,FITC,CY5,RhodamineB,PNA,EDNAS/dabcyl,Biotin等各种修饰的高质量多肽。国肽生物具有成熟的荧光标记多肽技术,优良的纯化生产工艺,定制荧光修饰的多肽,国肽生物是值得信任的品牌。
成功案例:
序列Cy5-betaA-YNDEDPEKEKRIKELELLLMSTENELKGQQAL,CY5进行修饰。
HPLC分析:
MS分析:
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