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尿液干化学检测的检测原理

2022.2.11

  用于对尿液进行定性和半定量检测。

  1、葡萄糖:葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢,过氧化氢在过氧化物酶的作用下释放新生态氧,氧化碘化钾,发生颜色变化。

  本实验对葡萄糖的检测是特异性的,大量维生素C可使实验出现假阴性结果;高比重碱性尿,亦可造成糖检出偏低,使低糖浓度尿呈阴性。

  2、胆红素:直接胆红素在酸性条件下与二氯苯胺重氮盐偶联,生成偶氮染料。

  2.1标本必须新鲜,以免胆红素在阳光照射下成为胆绿素。

  2.2尿液中含高浓度维生素C和亚硝酸盐时,抑制偶氮反应使胆红素测定呈假阴性。

  2.3患者接受大剂量氯丙嗪治疗或尿中含有盐酸苯偶氮吡啶的代谢产物时呈假阳性。

  3、酮体:乙酰乙酸、丙酮在碱性条件下与亚硝基铁氰化钠反应,生成紫红色化合物。

  3.1尿液必须新鲜,及时送检,以免因酮体的挥发或分解出现假阴性结果和结果偏低。

  3.2不同病引起的酮症,因酮体的成分不同,同一病人不同病程可使分析结果有差异。

  4、比重:采用多聚电解质离子解离法。尿中以盐类形式存在的电解质(MX)中的M阳离子(以NA为主)与离子交换体反应置换出氢离子,氢离子与酸碱指示剂反应,发生颜色变化。

  该检验不受尿液中某些不含离子成份(如葡萄糖)的影响,也不受不透色的染料的影响,高度缓冲的碱性尿液会给出相对于其它方法较低的读数,当尿中含有蛋白质(1g/L-7.5g/L)时可使比重读数偏高.

  5、隐血:血红蛋白具有过氧化物酶样活性,可使过氧化物分解释放出新生态氧,氧化指示剂,使指示剂出现颜色变化。

  5.1干化学法既可与完整的红细胞反应,又能测定尿中的游离血红蛋白,造成仪器法与镜检法有差异。

  5.2尿中含有的易热酶、肌红蛋白或菌尿可引起假阳性发应。

  5.3大量维生素C可干扰试验,使结果呈现假阴性。

  6、酸碱度:采用酸碱指示剂法。

  本试验一般认为无干扰,细菌繁殖尿样可影响pH值,使尿液呈碱性。

  7、蛋白质:它基于某种特定的pH指示剂负电荷受蛋白质的阳离子吸引,进一步电离。使指示剂发生颜色变化。这种现象称指示剂蛋白误差法。

  对于高度缓冲的碱性尿,有可能得到假阳性结果,如果尿样被季铵盐类化合物及某些防腐剂或清洗剂污染也会导致假阴性.

  8、尿胆原:尿胆原在强酸性条件下,与重氮盐偶联生成紫红色染料。

  尿液中一些内源性物质如胆色素原、吲哚、胆红素等可使尿胆原检查结果出现假阳性,一些药物(如吩噻嗪)也可干扰试验。

  9、亚硝酸盐:采用亚硝酸盐还原法。亚硝酸盐与芳香族氨基磺胺发生重氮反应,生成重氮肥化合物,而重氮化合物与四氢苯并喹啉3-酚偶联,生成红色偶氮染料。亚硝酸盐的检出率受三个因素影响:

  ①尿路感染的细菌是否含有硝酸盐还原酶,②食物中是否含有硝酸盐,③尿液标本是否在膀胱停留4小时以上。符合以上三个条件,此试验的检出率为80%,反之可能呈阴性结果。标本放置过久或污染细菌可呈假阳性。

  10、白细胞:采用白细胞酯酶法。吡咯酚酯在中性粒细胞中酯酶的水解作用下,产生游离酚,游离酚与苯基重氮盐偶联,生成紫红色偶氮染料。

  10.1标本必须新鲜、及时测定,以免白细胞破坏,导至化学法与镜检法人为的试验误差。

  10.2此法只能测中性粒细胞,不能与单核细胞等反应。

  10.3尿液中污染甲醛或含有高浓度胆红素或使用某些药物时,可产生阴性结果。

  10.4尿蛋白>5g/L或尿液中含有大剂量先锋霉素Ⅳ或庆大等药物时,可使结果偏低或出现假阴性结果。

  11、抗坏血酸:采用还原法。抗坏血酸具有1,2---烯二醇还原性基团,在碱性条件中,将氧化态蓝色的2,6-二氯酚靛酚染料还原为无色的2,6一二氯二对酚胺。

  当尿中含有氧化剂时(如高锰酸钾\次氯酸盐等)会影响本检验的灵敏度.

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