多聚螯合物酶组化实验——UIP 法
| 实验方法原理 | UIP（universal immuno-enzyme polymer）法，即通用免疫酶复合物法，是 Nichirei 发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与 EnVision 法相似，不同的是 UIP 复合物为 HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物（N-Histofine 复合物）。因 N-Histofine 复合物相对分子质量较 EnVision 复合物相对分子质量稍小，理论上具有更强的穿透力。 |
|---|---|
| 实验材料 | |
| 试剂、试剂盒 | |
| 仪器、耗材 | |
| 实验步骤 | 1. 4 μm 常规石蜡切片经烤片后，常规二甲苯、乙醇脱蜡至水，PBS 洗 3 min×3 次。 2. 预处理组织切片（可用酶消化或 AR 或不作任何处理，依一抗质量而定）。 3. PBS 洗 3 min×3 次。 4. 0.3％ H2O2 阻断内源性过氧化物酶 15 min，PBS 洗 3 min×3 次。 5. 适当稀释特异性一抗，37℃ 孵育 1 h，PBS 洗 3 min×3 次。 6. N-Histofine 复合物（HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物）孵育 30 min，PBS 洗 3 min×3 次。 7. 水洗，复染，常规树胶封片。 8. 结果观察。 展开 |
| 注意事项 | UIP 法缺点是多聚物中有 N 末端暴露，形成的电荷能和组织细胞发生静电吸附，可造成非特异性染色，染色时需平衡静电荷。 |
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