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夹心法ELISA实验结果定性判断测定方法

2019.11.29

定性测定的效果判别是对受检标本中是否含有待测抗原或抗体作出"有"或"无"的简略答复,ELISA试剂盒分别用"阳性"、"阴性"标明。"阳性"标明该标本在该测定系统中有反应。"阴性"则为无反应。用定性判别法也可得到半定量效果,即用滴度来标明反应的强度,其实质仍是一个定性实验。在这种半定量测定中,将标本作一系列稀释后进行实验,呈阳性反应的稀释度即为滴度。根据滴度的凹凸,可以判别标本反应性的强弱,这比查询不稀释标本呈色的深浅判别为强阳性、弱阳性更具定量意义。

夹心法ELISA实验效果定性判别测定

a.阳性判定值

阳性判定值(cut-off value)一般为阴性对照A值加上一个特定的常数,以此作为判别效果阳性或阴性的标准。

阳性判定值=NCX+0.05

标本A值>阳性判定值的为阳性,小于阳性判定值的为阴性。应留心的是,式中0.05为该试剂盒的常数,只适合于该特定条件下,而不是对各种试剂均可通用。

根据以上叙说可以看出,ELISA试剂盒在这种方法中阴性对照和阳性对照也起到实验的质控效果,试剂蜕变和操作不当均会发作"实验无效"的结果。

标本/阴性对照比值

在实验条件(包括试剂)较难保证安稳的情况下,这种判别法较为适宜。在得出标本(S)和阴对照(N)的A值后,核算S/N值。也有写作P/N的,这儿的P不代表阳性(positive),而是患者(patient)的缩写,不应误解。为防止混杂,更宜用S/N标明。在前期的间接法ELISA中,有些作者定出S/N为阳性标准,现多为各种测定所沿用。实际上每一测定系统应该用实验求出各自的S/N  的阈值。更应留心的是,N所代表的阴性对照是不含受检物质的人血清。


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