营养琼脂的灭菌方法
营养琼脂用途：用于分子生物学中的培养。
原理：蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；琼脂是培养基的凝固剂。
| 成分 |
含量(g/L |
| 蛋白胨 | 10.0 |
| 牛肉粉 | 3.0 |
| 氯化钠 | 5.0 |
| 琼脂 |
15.0 |
| pH值 | 7.3 ± 0.1 25℃ |
用法：
称取本品 33.0g ,加热溶解于 1000ml 蒸馏水中,分装三角瓶 ,121℃高压灭菌 15分钟,备用。
检验原理：
蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子等其他营养物质；氯化钠用于维持培养基的渗透压；琼脂为凝固剂。
外观：
干粉培养基为淡黄色粉末。
制备好的培养基为淡黄色透明固态。
注意事项：
本品仅限于实验室使用。干粉培养基出现过期、结块或变色，请勿使用。
保存条件和保质期：
干粉培养基在5-30°C 下干燥避光保存，其保质期为三年。制备好的培养基须在2-8°C 干燥避光保存。
微生物灵敏度：
接种以下质控菌株，放置36℃±1℃需氧培养24 小时。
|
质控菌株 |
菌株编号 |
接种量（CFU） |
生长情况 |
回收率 |
其他特征 |
|
大肠埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
＋＋＋ |
≥70% |
无色大菌落 |
|
枯草芽孢杆菌 |
ATCC 6633 |
10-100 |
＋＋＋ |
≥70% |
白色不规则菌落 |
|
单增李斯特氏菌 |
ATCC 19114 |
10-100 |
＋＋＋ |
≥70% |
白色小菌落 |
|
金黄色葡萄球菌 |
ATCC6538 |
10-100 |
＋＋＋ |
≥70% |
有黄色色素 |
|
蜡样芽孢杆菌 |
ATCC 11778 |
10-100 |
＋＋＋ |
≥70% |
白色不规则菌落 |
参考文献：
1. GB4789.28-2013 中华人民共和国食品安全国家标准 食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求.
2. GB/T5750.12-2006 中华人民共和国生活饮用水标准检验方法 微生物指标
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