一般mNGS的RNA检测流程包括逆转录、二链cDNA合成、预扩增/等温扩增、cDNA片段化和PCR扩增等流程[7]。研究团队通过优化RNA建库步骤、缩短建库时间,使mNGS操作简便,更适合临床使用。该团队将这种简便、快速、高灵敏度的检测方法命名为CATCH(pathogeniCrnA/dna hybrid Tagmentation teCHnology)。CATCH可跳过二链cDNA合成,通过优化延伸和PCR步骤,将整个文库制备过程缩短为3小时,人工处理时间为35分钟(图1)。该方法对SARS-CoV-2的检测限为39.2拷贝/test,A型流感病毒为278.1拷贝/mL,其重复性、稳定性和抗干扰性都表现出了较好的性能(表1)。

图1. CATCH工作流程示意图。来源:medRxiv